На одной волне — это… Что такое На одной волне?
- На одной волне
с кем, с чем. Разг. Одинаково, так же, как кто-л. другой, что-л. другое. НРЛ-81.
Большой словарь русских поговорок. — М: Олма Медиа Групп. В. М. Мокиенко, Т. Г. Никитина. 2007.
- На зелёной волне
- Переться (пройтись) по голубой (синей) волне
Смотреть что такое «На одной волне» в других словарях:
Реактор на бегущей волне — (реактор самоед, реактор Феоктистова) теоретическая концепция ядерного реактора на быстрых нейтронах, работающего на уране 238 за счёт наработки из него плутония 239. Главное отличие идеи от других концепций реакторов размножителей в том,… … Википедия
ЛАЗЕР — (оптический квантовый генератор), устройство, генерирующее когерентные эл.
ВОЛНА — бьёт ложку чью. Пск. Кто л. чувствует себя лишним, подвергается притеснениям в семье. СПП 2001, 22. (Золотая) волна из под угла (под угол) бьёт у кого, где. Волг. Одобр. О богатой, благополучной жизни. Глухов 1988, 14, 53. Зелёная волна. Публ.… … Большой словарь русских поговорок
Державина, Екатерина Владимировна — Екатерина Владимировна Державина (род. 1967(1967)) российская пианистка. Начала заниматься музыкой в шесть лет под руководством Юрия Полунина, затем училась в музыкальной школе имени Гнесиных у Валерии Полуниной, окончила Российскую академию… … Википедия
РЕНТГЕНОВСКИЕ СТОЯЧИЕ ВОЛНЫ — стоячие волны, возникающие в достаточно толстых монокристаллич. пластинах при падении на них «жёсткого» рентг.
излучения (с длиной волны 5 20 нм) под углом Брэгга (при выполнении Брэгга Вульфа условий )и осуществлении в них динамич. дифракции… … Физическая энциклопедияВертолётоносец — … Википедия
Кайл XY (сериал)
Бурманская кошка — Бурманская кошка … Википедия
Кайл XY (телесериал) — Кайл XY Kyle XY Жанр фантастика, драма, детектив Автор идеи Эрик Бресс, Джей Меки Грубер Продюсер Julie Plec Charlie Gogolak Curtis Kheel В главных ролях Мэтт Даллас … Википедия
Вертолетоносец — Вертолётоносец класса «Москва», спроектированный как противолодочный крейсер (подпалубный ангар вмещает 14 вертолётов) Вертолётоносец разновидность авианосцев, специально предназначенная для несения вертолётов, и поэтому не имеющая самолётного… … Википедия
излучения (с длиной волны 5 20 нм) под углом Брэгга (при выполнении Брэгга Вульфа условий )и осуществлении в них динамич. дифракции… … Физическая энциклопедия«Википедия более односторонняя, чем когда-либо», Ларри Сэнджер часть 2
Семья Байден: китайские предложенияНа этом этапе защитники Википедии вполне могут вернуться к своему представлению о том, что разрешены только «надежные источники», и, кстати, никакие надежные источники не придавали большого значения вышеупомянутому видео или ноутбуку.
«Но, — вы вполне можете заметить, — какое-то время это были большие новости. А Википедия думала, что надежных источников вообще нет? Почему нет?» Причина в том, что источники, которые обеспечивают основное освещение консервативных точек зрения, включая Fox News, The New York Post и (UK) Daily Mail, а также почти все новые консервативные источники средств массовой информации, которые являются единственными выходы делать какие — либо отчеты о многих важных историях, все были добавлены к списку источников, которые «не рекомендуются» за освещение политических новостей. Это не шутка и не преувеличение. Источники, поддерживающие республиканцев, даже самые распространенные, просто не могут быть использованы в Википедии, даже для объяснения точки зрения республиканцев. (Я расскажу об этом подробнее в последнем разделе ниже.)Скандал с Байденом в Китае похож и рассматривается в Википедии аналогичным образом. Здесь Хантер был директором совместного предприятия американской компании Rosemont Seneca, где Хантер был партнером, и Bohai Capital, китайской инвестиционной компании, контролируемой государством.
Совместное предприятие называлось BHR. Согласно взрывным показаниям Тони Бобулински, высшего руководителя Bidens по определенным сделкам в Китае, Хантер организовал для Джонатана Ли , генерального директора Bohai Capital, «рукопожатие» со своим отцом, а Джо Байден, по словам Бобулински, принимал непосредственное участие в сделках.В дополнение к интервью Бобулински, множество подтверждающих доказательств поступает из того же ноутбука Хантера Байдена, упомянутого выше, например, электронное письмо, в котором говорится, что братья Хантер и Джим Байден вместе с «большим парнем» — Бобулински опознал его как Джо Байдена — каждому из них будет предоставлена доля в капитале предприятия с китайским энергетическим гигантом CEFC.
Можно ли найти какую-либо информацию о скандале с «Чайна Байден» — даже в искаженной, предвзятой форме — в статье в Википедии о Джо Байдене? Неа. На момент написания статьи в этой статье не было ни слова о сделках с Китаем, Rosemont Seneca, Тони Бобулинкси, ноутбуке или CEFC.
Но разве информацию по этим вопросам можно найти где-нибудь в Википедии? Ну да, немного. Большая часть этого снова в статье о Хантере Байдене , написанной таким образом, чтобы Хантер выглядел как можно лучше, несчастной жертвой «ложных обвинений» Трампа (эти точные, пренебрежительные слова действительно используются).Опять же, это еще не все, но дело в том, что скандалы с Байденом глубоко раскололи американский народ. Идеологически нейтральный ресурс мог бы полностью и справедливо объяснить обе стороны, предоставляя читателю возможность принимать собственные решения. Это то, что делает Википедия? Нет. Википедия явно выровнена с одной стороны. Вы можете утверждать, что это единственная законная сторона; но ведь именно так говорят о себе многие идеологи. Вы не можете всерьез утверждать, что Википедия рассматривает скандалы с Байденом нейтрально. Это сильно предвзято.
Ни одного из мирных 93%.
Беспорядки Антифа / BLM
Далее предлагаю посмотреть несколько статей о беспорядках на Антифа и BLM в 2020 году.
В американском политическом сообществе не может быть более резкого культурного разрыва, чем реакция на эти беспорядки. Беспорядки были зажжены особенно после 26 мая 2020 года смерти (или, как большинство людей ,думаю, убийства) Джорджа Флойда. Национал-демократы в целом поддержали мятежников; изображали их как «в основном мирных» активистов против фашизма и расизма, даже вкладывающих деньги в их защиту; серьезно отнеслись к идее о том, что мы должны «освободить полицию» или поддержали аналогичные предложения о «реформе» полиции; и упорно сводили к минимуму месяцы кровопролития, опасностей и разрушений, вызванных беспорядками. Республиканцы не скрывали своей ненависти к беспорядкам, если не возражали против мирных протестов; их презрение к бунтовщикам; их симпатии к пострадавшим районам; и их удивление и недоверие к самому предложению, что мы должны «оправдать полицию». Они также несколько оттеснили идею о том, что Соединенные Штаты были настолько ужасно расистскими, что страна должна внести кардинальные изменения, например, в полицейскую практику или пропаганду против белых в школах.
Обе стороны в целом согласились с тем, что с реальными примерами жестокого обращения со стороны полиции следует бороться более сурово и что в обществе, как никогда ранее, нет места настоящему расизму.Нейтральный подход, конечно, обеспечит широкое фактическое освещение таких вещей, как место проведения беспорядков, сколько людей было арестовано, а также количество ранений и смертей, связанных с беспорядками. Основная статья в Википедии на самом деле , кажется, делает хорошую работу там, насколько я могу судить. Но, кроме того, реакция на беспорядки с обеих сторон будет полной и справедливой. Предлагались различные теории причин беспорядков; Демократические теории, конечно же, будут основываться на жестокости полиции и расистских взглядах и группах, в то время как республиканские теории, признавая это в некоторой степени, также будут обсуждать преднамеренную левую организацию и оспаривать масштабы проблем, примером которых является дело Джорджа Флойда.
Неудивительно, что Википедия очень обширна.
Есть длинная сводная статья « Протесты Джорджа Флойда », а также « Список протестов Джорджа Флойда в Соединенных Штатах » и длинная статья под названием « Расовые беспорядки в США в 2020–2021 годах».. » Консерваторов беспокоят не протесты, а политическое насилие в форме беспорядков. Итак, остановимся на последней статье. В статье действительно есть полезная статистика. Несмотря на то, что статья помечена как “беспорядки”, в информационном поле статьи есть раздел “Жертвы”, в котором говорится, что “По меньшей мере 25” человек погибли, более 2000 сотрудников правоохранительных органов получили ранения и “неизвестное число гражданских лиц”, а ущерб имуществу составил 1-2 миллиарда долларов. Действительно, после указания на то, что 93% протестов были “мирными и неразрушающими”, суть заключалась в том, что из-за этих досадных оставшихся 7% беспорядки были “событием гражданских беспорядков с самым высоким зарегистрированным ущербом в истории Соединенных Штатов”. Пока все хорошо: в статье в этих отношениях излагаются факты, которые хотели бы представить все стороны.
Однако по мере того, как мы углубляемся в статью, предвзятость становится гораздо более явной. «Волна сноса памятников» — странный способ описать преднамеренное незаконное разрушение общественной скульптуры — «и изменение названий произошло во всем мире, особенно в Соединенных Штатах». А как насчет реакции на беспорядки? Нам говорят, что это был «культурный расчет». «Общественное мнение о расизме и дискриминации быстро изменилось после протестов, со значительным усилением поддержки движения Black Lives Matter и признанием институционального расизма». Это правда, что с самого начала поддержка BLM увеличилась. Но поддержка быстро упала, поскольку организация стала ассоциироваться с разрушительным насилием в чернокожих кварталах, агитацией против финансирования полиции и радикальными коммунистическими взглядами. Даже к сентябрю 2020 года по данным опроса Pew, поддержка упала на 12% с 67% до 55%. Последний пункт можно найти ниже в статье, но он не упоминается в более важном введении к статье, где просто говорится, что BLM «пользуется значительно большей поддержкой».
Кроме того, поддержка BLM позже продолжала падать до уровня, предшествующего бунту. Даже New York Times, которую вряд ли можно назвать консервативным рупором, озадаченно замечает: «Эти данные…противоречат идее о том, что в стране произошла расовая расплата».Остальная часть статьи, которую, признаюсь, я не прочитал полностью, так как она очень длинная, выглядит как тщательно детализированная краткая информация о причинах и событиях беспорядков 2020 года. Что касается причин, то одно из ключевых утверждений таково: «Черные люди, составляющие менее 13% населения Америки, убиты полицией с непропорционально высокой частотой, более чем в два раза чаще, чем белые люди». Хотя это, без сомнения, правда, но соответствующий факт, который часто упоминается республиканцами, опускается: темнокожие мужчины с гораздо большей вероятностью совершат преступления, которые могут потребовать вызова полиции. Следовательно, как сказано в одном исследовании, «Мы не находим доказательств анти-черных или антииспаноязычных различий в перестрелках, и белые офицеры не чаще стреляют в мирные меньшинства, чем небелые офицеры».
Подобной информации, которая кажется несовместимой с взглядами демократов на расовую несправедливость в отношении полиции, в статье, похоже, нет.Наконец, есть раздел «Социальное воздействие». Это полностью сосредоточено на более широких социальных и политических изменениях, которые предположительно были вызваны реакцией на беспорядки (и протесты). В этом разделе, да и на протяжении всей статьи, полностью замалчивается критика республиканцами беспорядков и политиков-демократов, которые поддерживали насилие или делали вид, что его не было; консервативной реакции на Антифа и BLM; и сопротивления социальным последствиям, таким как кампании «Defund the Police» и некоторые предложения по «реформе» полиции, которые значительно усложнят работу полиции. Здесь нет абсолютно никаких упоминаний о заявлениях консерваторов и республиканцев о том, что беспорядки были намеренно и даже централизованно организованы левыми организациями. Критика Black Lives Matter не может быть найдена в статье ни в какой форме,
Их мнения бесполезны и не нуждаются в упоминании, говорит Википедия.
Президентские выборы в США в 2020 году
Затем, конечно же, есть спорные президентские выборы в США в 2020 году. Это вызывало споры не только по партийным линиям, это была мучительная борьба внутри Республиканской партии, в которой республиканцы и центристы от истеблишмента — которые никогда особенно не любили Трампа — противостояли Трампу и его шумным рядовым сторонникам. Нарушения, связанные с отправкой большого количества бюллетеней по почте, отказом в допуске наблюдателей и многим другим, вызвали массовый резонанс со стороны республиканцев. Дело дошло до 6 января, когда Конгресс собирался проголосовать за то, принимать ли подсчет голосов Коллегии выборщиков. Как говорится в статье в Википедии «Попытки отменить президентские выборы в США 2020 г.» Около 140 республиканцев Палаты представителей и 11 республиканцев Сената были готовы подать возражения. Затем, конечно же, произошло печально известное вторжение в здание Капитолия — как раз вовремя, чтобы сделать такие возражения еще более дорогостоящими с политической точки зрения для представителей, занимающих шаткие места.
Вышеупомянутая статья должна была стать очередной пропагандистской статьей. Так оно и есть — насквозь пронизано вопиющей предвзятостью. Вот как это начинается:
После президентских выборов в США 2020 года, на которых победил Джо Байден, тогдашний президент Дональд Трамп, а также его кампания и его доверенные лица предприняли агрессивные и беспрецедентные попытки отрицать и отменить выборы. Попытки отменить выборы были охарактеризованы как попытка государственного переворота и реализация «большой лжи». Трамп и его союзники выдвигали многочисленные ложные утверждения о том, что выборы были украдены у Трампа в результате международного коммунистического заговора, фальсификации машин для голосования и фальсификации результатов выборов.
Ниже у нас есть еще одна жемчужина:
Stop the Steal [жирный шрифт в оригинале] — это крайне правая и консервативная кампания и протестное движение в Соединенных Штатах, продвигающее теорию заговора, которая ложно утверждает, что во время президентских выборов 2020 года произошло широкомасштабное фальсификация выборов, чтобы лишить действующего президента Дональда Трампа победы над бывшим вице-президентом Джо Байденом.
Я не буду вдаваться в подробности; вы можете представить. На самом деле есть несколько статей, связанных с нарушениями на выборах 2020 года и их последствиями. В дополнение к рассмотренному выше, есть также реакция республиканцев на заявления Дональда Трампа о фальсификации выборов 2020 года , в которых говорится: «Трамп ложно утверждал, что выиграл выборы, и сделал много ложных и необоснованных заявлений о фальсификации выборов». Конечно, само название здесь является хорошим примером правила 11 Сола Алинского: «Выберите цель, заморозьте ее, персонализируйте, поляризуйте». Другими словами, негативная реакция на выборы 2020 года была не широким республиканским движением, а всего лишь возмутительной и незаконной попыткой одного ненавистного и дискредитированного человека отменить выборы.
Очевидно, я мог бы продолжить и поговорить о вторжении в Капитолий 6 января: что на самом деле произошло? В « Атаке на Капитолий США в 2021 году» вы узнаете, что Капитолий «был взят штурмом во время беспорядков и жестокого нападения на Конгресс США» «толпой сторонников президента Дональда Трампа», которые «попытались отменить его поражение в Президентских выборах 2020 года».
Неважно, что здесь есть споры по нескольким деталям. Многие республиканцы считают, что ряд левых и агентов ФБР были среди тех, кто вторгся в здание Капитолия. В любом случае, что именно произошло, не ясно тем из нас, кто часами смотрел видеозаписи вторжения. Я смотрел с нарастающим ужасом, и у меня были вопросы, даже когда это произошло.Республиканцы, естественно, по-разному относятся к речи Трампа 6 января — одни считают ее оправданной, другие — безответственной — но в целом они согласны с тем, что его нельзя винить в нападении. Такие тонкие точки зрения, столь непопулярные в Википедии, неудивительно, что они вообще не представлены в статье. Вместо этого в нем рассказывается история, которая, опуская ключевые детали, звучит так, как будто вторжение было спонтанным восстанием сумасшедших людей MAGA, которых Трамп сознательно довел до предательской ярости. Возможно, именно это и произошло; но в нейтральной статье по этой теме также будут набросаны альтернативные повествования, представлена вся соответствующая информация, на основе которой разные люди строят свои аргументы, и предоставлена читателю возможность принять собственное мнение о том, что на самом деле произошло.
Вряд ли нужно добавлять, что Википедия твердо связана с одной политической партией, а ее статьи о выборах 2020 года выглядят как партийная пропаганда.
Грохот
Фильм Время (2021) смотреть онлайн в хорошем HD 1080 / 720 качестве
«Я хотел, чтобы зритель чувствовал себя как при просмотре „Сумеречной зоны“. Я обожаю этот сериал: он странный, ты ломаешь над ним голову, — говорит Шьямалан. — Зрителям „Времени“ должно казаться, что они тоже находятся в опасности. Мне хотелось, чтобы они узнавали все постепенно, шаг за шагом, как герои фильма».
Приятели даже придумывают собственный шифр, который используют для передачи друг другу секретных сообщений. Несмотря на проблемы в отношениях, Гай и Приска рады, что получили приглашение на эксклюзивный пляж. И вот они уже садятся с детьми в автобус и отправляются туда, где их ждут серфинг, солнце и песок. К ним присоединяется еще одна семья: влюбленный в свою работу кардиохирург Чарльз (Руфус Сьюэлл), его молодая жена Кристал (Эбби Ли), их шестилетняя дочь Кара (Кайли Бегли) и пожилая мать Чарльза Агнес (Кэтлин Челфант). Водитель доставляет их к месту назначения. Он останавливает автобус на обочине и показывает гостям тропинку, которая ведет на пляж. Число приехавших на пляж растет. К семье Капа и семье Чарльза присоединяются рэпер Mid-Sized Sedan (Аарон Пьер) и супруги Ярин (Кен Люн) и Патрисия (Никки Амука-Бёрд). Через некоторое время на берег выносит труп неизвестной женщины. Затем взрослые обнаруживают, что сотовая связь не работает, что пляж невозможно покинуть и что дети начинают взрослеть у них на глазах.
Однако, по словам коллег режиссера, «Время» — самый амбициозный его проект. «Это звучало так необычно и даже дико, что я сказал ему: возможно, это твоя самая безумная идея, — рассказывает давний партнер Шьямалана по кинопроизводству Ашвин Раджан. — Определенно, это один из самых сложных фильмов, которые он когда-либо снимал. Он вернулся к тому, что вдохновляло его как рассказчика. Он решил рассказать очень содержательную историю, в центре которой находится огромная опасность. Он исследует, как герои, исходя из своих характеров, действуют в этих условиях».
Исполнительный продюсер «Времени» Стивен Шнайдер, также работавший над фильмами «Визит», «Сплит» и «Стекло», считает, что в результате у них получился фильм, не похожий ни на что из ранее созданного. «Во „Времени“ впечатляет то, как у Найта все связано, — говорит Шнайдер. — В графическом романе важна не столько история, сколько атмосфера. Это скорее экзистенциальная притча. Найту же удалось проникнуть в ткань романа и изменить ее по-своему. Каждый персонаж имеет свой характер. У каждого есть своя проработанная история, наполненная темами, близкими каждому из нас, особенно в наши дни. Найт стремится запечатлеть все фантастичное, страшное, странное и сюрреалистичное». Чтобы придать этой захватывающей истории бо́льшую глубину и аутентичность, Шьямалан решил пригласить для съемок актеров разных рас и национальностей. Он хотел, чтобы в фильме были люди со всех концов света. «Каждый мой фильм должен говорить что-то обо мне. В этом фильме я хочу напомнить, что я иммигрант и что я рад этому, — говорит Шьямалан.
— В своей карьере я мало уделял внимания этому факту. Я снимаю фильмы в США, но я родился в Индии, в Пондичерри. Мне повезло, что я попал в Голливуд и получил возможность делиться своим творчеством со всем миром. Я решил отразить это в актерском составе с помощью акцентов — испанского, немецкого, английского из разных регионов. Я думаю, что это очень красиво».
Когда Гарсиа Берналь начал читать сценарий Шьямалана, он так увлекся сюжетом, что не успокоился, пока не прочитал до конца и не узнал развязку истории. «Я прочитал сценарий с большим интересом. Мне хотелось узнать, что, черт возьми, происходит, — вспоминает Гарсиа Берналь. — Сюжет очень динамичный. Повествование все время идет вперед, все быстро меняется. История напомнила мне античную трагедию. Герои не могут управлять своей судьбой и пытаются понять, почему боги послали им такое испытание. В этом есть что-то вневременное, и это повышает ставки». По мере нарастания угрозы Гай должен преодолеть шок и поверить в каждое новое страшное событие. Ему надо найти в себе силы и мужество. «Событий так много, что меняется его восприятие себя и все его бытие, — говорит Гарсиа Берналь. — Он отбрасывает опасения и думает только о том, как защитить своих близких. Теперь он рассуждает так: „Я отец этих детей и муж этой замечательной женщины. Нужно вытащить их отсюда“. Такова трансформация Гая». Это одна из главных ролей, поэтому выбор актера для нее очень важен.
Для продюсера Ашвина Раджана Гарсиа Берналь был идеальным выбором. «Гаэль невероятно обаятельный и при этом очень человечный, — говорит Раджан. — Он играет отца двоих детей и мужа Приски в опасной для жизни ситуации, которую мы видим глазами его героя. Мы воспринимаем все происходящее через него и его детей. Гаэль проделал прекрасную работу. Он буквально затягивает зрителя в повествование».
Крипс наиболее известна своим участием в номинированной на премию «Оскар» драме «Призрачная нить». «Вики в роли Приски нужно было выразить подкупающие зрителей силу и эмоциональность матери, — говорит продюсер «Времени» Ашвин Раджан. — Когда герои попали в такую беду, актеры, их играющие, не имеют права быть неубедительными. Еще одна особенность Приски в том, что ей сопереживаешь. Да, разрыв в браке с Гаем — это и ее рук дело. Тем не менее мы остаемся на ее стороне и хотим, чтобы их отношения восстановились». Крипс вспоминает, что читать сценарий «Времени» было страшно, но в то же время ей хотелось проследить, как органично в современном голливудском триллере удалось соединить стремительный хоррор с философскими темами. «Я не знаю, почему, но, когда я читала сценарий, мне было не по себе, — признается Крипс. — Как будто в мой организм попало что-то чужеродное и опасное. Но в то же время я отчетливо помню, что история меня тронула — чем именно, я опять не могу объяснить. Темой жизни и смерти, темой любви.
Это ведь глубокая история о любви». Актриса решила не готовиться к роли заранее, а начать знакомство со своей героиней уже на съемочной площадке. «Как я это делала? Я каждый день сидела на пляже и смотрела, как Приска идет ко мне, — говорит Крипс. — Я видела ее». В Гаэле Гарсии Бернале европейская актриса нашла родственную душу. Он подходит к работе над ролью почти так же, как она. «Мы с Гаэлем, похоже, на одной волне, — говорит Крипс. — Я думаю, мы оба подошли к этому фильму без каких-либо ожиданий, как два человека, которые просто принимают все происходящее как есть. Если оба в паре действуют синхронно, роли могут получиться действительно глубокими».
Он путешествует вместе с женой, но создается впечатление, что его настоящая любовь — это работа. Перед прослушиванием на роль властного Чарльза английский актер Руфус Сьюэлл считал, что он совсем не подходит на эту роль. «Я очень внимательный читатель, и я всегда отмечаю, что мне нравится и что меня смущает, — говорит номинант на премию. Эмми за роль в сериале «Удивительная миссис Мейзел». — Этот персонаж настолько противоречив и труден, что мне пришлось перечитывать сценарий, чтобы сложить о нем впечатление. Когда я сыграл его на прослушивании, я совершенно не ожидал, что Найту понравится моя интерпретация этого героя». Когда мы знакомимся с Чарльзом, он производит впечатление умного и талантливого человека. Однако вскоре после того, как он приезжает на пляж, становится ясно, что с ним что-то не так. Похоже, Чарльз не совсем здоров психически. Он теряет самообладание настолько, что представляет серьезную угрозу для окружающих. «Мы не всегда хорошо себя знаем. Порой у нас бывают глубинные импульсы, которые перерастают во вспышки безумия, — говорит Сьюэлл.
— Я не раз сталкивался с тем, как подавленные страхи и конфликты могут вырываться наружу совершенно непредсказуемым и пугающим образом».
«В какой-то момент мне даже было не так важно, о чем фильм. Найт — один из моих кумиров, — признается Вулф. — Но когда я читал сценарий, я то плакал, то кричал, то смеялся. Не знаю, как так получилось. Это был один из самых динамичных и мощных текстов, который мне когда-либо приходилось читать. Невероятно глубокая и трогательная история, которая заставляет задуматься». Готовясь к съемкам, Вулф читал и конспектировал научные работы по детской психологии, в частности труды австрийского психолога Бруно Беттельгейма («О пользе волшебства. Смысл и значение волшебных сказок») и швейцарского психолога Жана Пиаже. «Я с головой погрузился в исследование о детях и их пространственных отношениях, психических ограничениях, узнал, как странно иметь большие руки, — рассказывает Вулф. — Исследование было очень интересное. Но больше всего мне помогла связь с самим собой в детстве. Я вспомнил, каково это — быть бесхитростным и открытым ко всему. Тогда я ощутил самую тесную связь с Трентом». По словам Вулфа, необычный сюжет «Времени» не отвлек его от сочувствия мальчику, ставшему мужчиной до того, как он был к этому готов.
«Мое взросление тоже было непростым, — говорит Вулф. — Я всегда хорошо ладил с детьми, и я всегда на связи со своим внутренним ребенком. Я очень эмоциональный и открытый человек. Я такой с самого детства, и в подростковом возрасте я пытался это в себе подавить. Поэтому, когда я прочитал сценарий, я почувствовал, что история Трента — это аллегория моего взросления: у меня тоже было ощущение, что я вырос за 24 часа». Вулф считает, что по этой причине роль Трента будет для него очень важной и близкой. «Думаю, что это одна из таких ролей, которые останутся со мной», — признается Алекс.
И все-таки, когда пляж начинает превращать Мэддокс в юную девушку, собственное тело становится для нее чужим, и она не знает, как вести себя даже с самыми близкими людьми. «В начале фильма есть момент, когда Мэддокс понимает, что взрослеет, и их отношения с матерью начинают меняться, — вспоминает Маккензи. — Когда ты становишься старше, все вокруг становится глубже: чувства и отношения теперь более сложные». Новозеландка Томасин Маккензи известна по работе в драме 2018 года «Не оставляй следов» и в фильме «Кролик Джоджо» 2019 года. Чтобы лучше понять героиню «Времени», Маккензи, как и ее коллега Алекс Вулф, искала похожий опыт в своей жизни. «Я много думала о своей семье, об отношениях с родителями и о том, как они изменились, когда я стала взрослее. Я защищаю от всего на свете свою младшую сестру, а мой старший брат так же относится ко мне», — объясняет Томасин. Однако, когда пришло время съемок, Маккензи приехала на съемочную площадку одна, впервые без членов своей семьи. К счастью, она могла обратиться за советом и утешением к коллегам.
«Вики и Гаэль за кадром относились ко мне тепло, как настоящие родители, — рассказывает Томасин. — Мне помогала мысль, что рядом есть люди, к которым я могу обратиться, если в чем-то сомневаюсь. Это была настоящая поддержка, особенно учитывая то, как далеко я была от дома. У нас сложились отношения, похожие на семейные».
— Я понимаю, каково это; переживания Кристал во мне очень откликаются. Очень много женщин по всему миру чувствуют себя так же». Кристал любит внимание, поэтому появляется на пляже в ярко-желтом бикини и выглядит как идеальная девушка из Инстаграма. Но неизвестные силы начинают превращать ее тело в нечто, далекое от юного совершенства. Когда по прекрасному лицу Кристал расползаются морщины, она пытается скрыть их с помощью макияжа, но ее усилия напрасны. Она в ужасе от того, что с ней происходит; ей тяжело не сойти с ума и мыслить трезво. «Кристал уверена — или ее убедили, — что внешность — это все, что у нее есть, — объясняет Эбби. — Ей страшно и больно терять красоту. Процесс идет так быстро, что она не успевает понять, как ей с ним справиться. Она не знает, что делать». Понять, что происходит с героиней, Эбби помог опыт работы в мире высокой моды, где принято строго оценивать внешность. «В силу профессии у меня сильная связь со своей внешностью и тем, как я веду себя в жизни. Я понимаю, как это повлияло на меня и какие возможности дало, — говорит Ли.
— Это сложные отношения. И Кристал возвела их в крайнюю степень. Наверное, она должна меня пугать, но я ей сочувствую. Она стала мне очень дорога».
«Найт ясно дал понять: он не хочет, чтобы Томасин, Алекс или я изображали детей, — объясняет Элайза. — Он хотел, чтобы мы были взрослыми физически и психически. Наша нервная система изменилась, но у нас нет жизненного опыта, сопутствующего этому развитию, и способности формировать мнение и видеть перспективы». Это необычная и сложная задача для актера, но именно поэтому Элайза взялась за эту роль. «Это же так интересно, — говорит Сканлен. — Конечно, это триллер, шокирующий и тяжелый, но в его основе лежат человеческие чувства, и это трогает. Мне кажется, этот фильм напоминает, что самое важное — это наши отношения с людьми… Когда я готовилась к съемкам, я нашла такой афоризм: „Единственная причина для существования времени — чтобы все не случилось одновременно“. Мне он очень нравится».
Но когда они прибывают на пляж, число отведенных им лет стремительно сокращается. «Одной из вещей, которые привлекли меня в героине, была история ее любви, — рассказывает Никки Амука-Бёрд, известная актриса Королевской шекспировской труппы. Она также известна ролями в фильмах «Восхождение Юпитер» и «Частная война». — В день, когда мы знакомимся с героями, они встречаются со всеми своими страхами. Патрисия проходит через это испытание вместе с мужчиной, который был с ней рядом много лет. Для меня это переживание было пронзительным». Амука-Бёрд и Кен Люн, сыгравший Ярина, готовились к роли вместе. Для создания близких и доверительных отношений в паре они делились личными историями о своих любимых. «Оглядываясь на образ, который я создала, я чувствую гордость за эту женщину. Я горжусь тем, какой путь она прошла, — признается Никки. — Это лучшее, что может случиться с твоей ролью». Как и многим другим актерам фильма, Никки понравилось, как незаметно Шьямалан вплел в динамичный триллер щемящий мотив скоротечности времени.
«Я люблю работы Найта за то, что он предлагает зрителю встретиться со страхом, и это очень смелое предложение, — говорит Амука-Бёрд. — Здесь мы встретимся с особенным страхом — страхом старости. Несмотря на фантастический сюжет, каждый примерит его на себя, ведь нам всем предстоит нечто подобное. Жизнь быстротечна, мы все будем терять любимых людей, все состаримся. Встречаясь с этим страхом лицом к лицу, вспоминаешь, как важно ценить каждое мгновение и то время, которое у тебя есть».
«Это история о группе людей с одной целью. Они были чужими друг другу, но станут друзьями, — рассказывает Кен. — Эта история показывает, как легко люди становятся друзьями. Мы ближе друг другу, чем кажется, и это мне очень нравится. Иногда, чтобы осознать это, нужно пройти через испытания».
«Я представляю его очень осознанным поэтом, — говорит Аарон. При подготовке к съемкам актер вдохновлялся такими музыкантами, как Джей Коул, Кендрик Ламар и Нипси Хассл. — Это поэты реального мира, осознанные, глубоко мыслящие и знающие, кто они такие. Mid-Sized Sedan — очень вдумчивый человек. Возможно, это мешает ему, а может, наоборот. Его очень интересно исследовать». Аарон и сам восходящая звезда. В 2018 году режиссер фильма «Лунный свет» Барри Дженкинс увидел его в роли Кассио в постановке «Отелло» в театре «Глобус» и пригласил на прослушивание для экранизации романа Колсона Уайтхэда «Подземная железная дорога». Он также играет Цезаря в полюбившемся критикам сериале Amazon. Аарон движется от драмы о периоде Гражданской войны в Америке к шокирующему миру триллера М. Найта Шьямалана. Актер признается, что раскрыть персонажа в таких невероятных обстоятельствах было непросто, но он был рад всем трудностям. «Роль такого многогранного героя — прекрасный актерский опыт, — рассказывает он.
— У Найта очень четкое видение результата, и в то же время он открыт для новых идей. Благодаря этому его работы всегда актуальны».
Он не только необыкновенно красив, но и дает нужное ощущение изоляции. Он находится примерно в 30 минутах езды от города Самана, что создавало проблемы при перевозке оборудования. «Доминиканская Республика — прекрасная страна с чудесными, добрыми людьми, — говорит продюсер «Времени» Марк Бьенсток. — Но сложность съемок в любой небольшой стране заключается в слабо развитой инфраструктуре для кинопроизводства. Поэтому огромное количество оборудования, команду и все необходимое пришлось везти из других стран. Доминикана находится на острове посреди океана, так что транспортировка была довольно масштабной задачей».
— Огромные суммы денег не сделают твой фильм лучше. Я даже думаю, что они только все испортят. Может показаться, что я снимаю крупнобюджетные фильмы, но это не так. Я всегда ставлю ограничения по сумме, которую мы можем потратить, и по средствам для решения разных проблем».
— Мы не могли провести даже один лишний день на том пляже». К счастью, режиссер известен своим умением все тщательно планировать. Перед съемкой он педантично составляет сценарную раскадровку для всех своих фильмов. Он практически не отклоняется от намеченной линии; она служит своеобразным креативным ориентиром не только для режиссера-сценариста, но и для каждого отдела, вовлеченного в процесс производства: операторов, проектировщиков съемок и костюмеров. «Я представлял себе определенный стиль этого фильма, где должны использоваться только угловые перемещения, а не прямые, — рассказывает Шьямалан. — С самого детства, когда я увидел „Ран“ и „Расёмон“ Акиры Куросавы, идея съемок на открытом воздухе с нарочито резкими движениями и постановкой кадра заинтриговали меня. Здесь не было никаких углов, поэтому пришлось добавлять их движениями камеры». Подход отлично подошел для того, чтобы передать ощущение замкнутости и угрозы открытого пространства. «Для героев этот пляж становится удушающе давящим, — объясняет Шьямалан.
— Вы видите, как они паникуют. Они пытаются выбраться, но здесь нет такой двери, через которую они могли бы уйти. Зрители чувствуют приступы клаустрофобии. То, что было прекрасным, становится гнетущим и опасным. Красивая, на первый взгляд, вода несет смерть. Медленное превращение чего-то безопасного в угрожающее — наша цель в фильме».
Мне придавал смелости один лишь факт ее присутствия на другом конце пляжа, снимающей второй план. В конце дня мы шли вместе ужинать. Иногда вдвоем. Это помогало мне держать внимание на повествовании». Кроме того, дочь Найти Салека Шьямалан, пианистка, ставшая R&B-музыкантом и выпустившая в этом году свой дебютный альбом, написала для фильма песню, которую исполнила Алекса Суинтон, а затем Томасин МакКензи в роли Мэддокс Капы. «Идея того, как на ваших глазах маленькая девочка становится талантливой певицей, — наш опыт со старшей дочерью, Салекой, — делится Найт. — Когда она была младенцем, она любила петь в машине, и мы с женой думали: «Ух, ей никогда не быть певицей, она очень плохо поет!». Теперь она одна из самых прекрасных певиц в мире! Я не могу поверить, что я так сказал, а теперь она выросла и доказала, что я был не прав. Именно это чувство восхищения собственными детьми, тем, кем они становятся, я хотел перенести на экран, — продолжает Шьямалан. — Я повторяю в фильме множество эмоций, которые испытал сам».
«У нас появилась идея провести съемки на пляже, который должен был производить впечатление изолированного, замкнутого, а актеры должны были словно «застрять» на нем. В этой ситуации ощущается вес стены, — считает Маршалл. — В Эль-Валье уже была часть стены. Поэтому моя задача заключалась в том, чтобы взять нашу стену и незаметно встроить ее в существующую с помощью штукатурки, строительных лесов, пены, краски и песка. Мы вписали стену в уже существующую. Лагуна располагалась за нами, а под возведенной стеной протекал очень маленький ручей».
Позже, на монтажно-тонировочном этапе, члены команды по визуальным эффектам сделали стену еще длиннее. Для этого они использовали фотографии натурального камня и в цифровом формате воссоздали его природную фактуру.
Они черпали вдохновение из тропических пейзажей фильма и в основном выбирали как будто выцветшие пастельные тона и более мягкие оттенки. «У нас получилась красивая, изысканная палитра фильма, — считает Маршалл. — Ее нельзя назвать приглушенной. Все цвета яркие, но в то же время мягкие. Мы хотели оставить возможность играть с желтым, зеленым и фиолетовым оттенками на фоне стены». Все решения соответствовали общей задумке М. Найта Шьямалана относительно фильма «Время». «Когда работаешь с Найтом, возникает ощущение, будто весь фильм — у него в голове, — рассказывает Маршалл. — Он уже продумал, как будет перемещаться камера. Передвижения камеры определяют художественное оформление фильма. А художественное оформление фильма влияет на передвижения камеры. Цвета служат для оформления картины. Мы кинематографическая семья. Каждый из нас знает Найта и понимает, что им движет».
Он старался напомнить актерам помладше, что они не просто дети, запертые в теле взрослых; на протяжении фильма они также взрослеют умственно и эмоционально. «Это действительно необычный сюжет. Он не похож на фильм „Большой“ с Томом Хэнксом в роли 12-летнего мальчишки, оказавшегося в теле 40-летнего мужчины, — говорит Шьямалан. — По мере старения твоего тела изменяется и матрица твоего мышления. Так что эта задача была интересна актерам».Физических изменений удалось достичь с помощью тщательно нанесенного грима, в том числе пластического. За это отвечала команда визажистов под руководством КРИСТИНЫ ВАЛЬЦ (главный художник по гриму фильмов «Скандал» и «Форсаж: Хоббс и Шоу»). Главным словом на площадке было «неуловимость». Меньше всего Шьямалан хотел, чтобы зритель отвлекался от непосредственного сюжета на резкие изменения во внешности актеров. «Я очень чувствителен к старению в кино, — рассказывает Шьямалан. — Если я вижу актера, на лицо которого наложили слишком много «возрастного» грима, я по-прежнему вижу его под этим гримом.
Мне хотелось, чтобы старение было передано настолько естественно и деликатно, что зритель мог наклониться к экрану и сказать: «Ой, действительно, у него есть морщины». Каждый актер фильма „Время“ носил пластический грим. У актеров были видны признаки старения, даже если вы этого не заметили. Вы могли увидеть морщинку у рта, когда актер начинал говорить. Все было сделано очень аккуратно и реалистично. В этом и заключается прелесть фильма: осознание медленно подкрадывается к зрителю».
Красота этого места притягивает, а масштаб — отталкивает. В фильме есть много моментов, в которых герои чувствуют себя невероятно маленькими на фоне стены, проходящей через щелевые каньоны».
Определяя, что́ будут носить самые юные персонажи фильма, Дункан разработала эскизы, которые подчеркивают те стремительные изменения, которые претерпевают их тела: их купальники становятся все меньше. «Мне было важно, чтобы плавки Трента были выполнены в забавных, детских, удивительных узорах и цветах. По мере взросления они становятся не только короче и теснее, но и выглядят все более странно. Подросток в плавках с детским принтом черепахи-серфера выглядит необычно. Есть что-то очень странное в том, что он одет в одежду маленького мальчика».
Для Мэддокс Дункан выбрала раздельный купальник более спортивного кроя. «Загвоздка с изменениями, которые переживает Мэддокс, заключается в том, что при знакомстве с юной героиней мы понимаем, что она уже находится на пороге взросления, — рассказывает художник по костюмам. — Я одела ее в очень спортивный купальник, который становится неудобным в нижней и верхней части тела. Когда Мэддокс переодевается в вещи своей мамы, она сразу же становится более женственной. Она снимает детские вещи и становится привлекательной женщиной. Это помогает ей свыкнуться со своим новым телом».
Он должен был отличаться непринужденностью. Мне хотелось, чтобы персонаж Гая был вне времени», — говорит Дункан. Одежда Приски, напротив, выглядит четче и структурированнее. «Мне очень понравилась идея одеть ее в вещи в полоску, — рассказывает Дункан. — В них она выглядит очень органично. Она смотрит на мир сквозь эти полосы — черные, белые и серые, — которые она создала для себя. Для нее мы сшили тунику, на рукавах которой свисающие кисточки. У туники асимметричный крой: иногда кажется, будто одежда Приски ее поглощает». Силуэт одежды Чарльза аккуратный, почти строгий. Однако в то же время его образы, по мнению Дункан, «подчеркивают его статность и привлекательность, демонстрируя, насколько великолепен Руфус Сьюэлл». «Красивая вязка, которую мы используем, напоминает мне о лабиринте мозга», — делится Дункан.
Аарон, который играет его, обладает такой глубиной и поэтичной мечтательностью, — считает Дункан. — Он носит несколько украшений, но они не очень броские. Вместо того, чтобы использовать режущие глаз цвета, множество узоров и массивные, яркие предметы гардероба, мы придерживались очень нейтрального, спокойного внешнего вида в йога-стиле или атмосфере дзен-буддизма. Он одет в рубашку из ткани открытого плетения, чтобы зритель видел его кожу с татуировками сквозь одежду. Нам показалось, что это будет правильным решением». Из всех персонажей Кристал одета ярче всего. Когда мы впервые видим героиню на экране, Кристал находится на курорте, а на ней вместо топа надет платок. Для похода на пляж она выбирает откровенное желтое бикини. Интересно, что Кристал — единственный персонаж, который носит одежду этого цвета в фильме. «Она стремится привлекать внимание. Кристал уверена в себе и осознает, что все смотрят на нее. Именно этого она и хочет, — рассказывает Дункан. — Мы выбрали смелое бикини, верхняя часть которого обвязана вокруг живота. Купальник украшен свисающими с бедра завязками. Кажется, будто зритель может распутать Кристал».В Исаакиевском соборе представили альбом с изображениями Александра Невского
дмитрий седовКультура 20 октября 2021
В музее-памятнике «Исаакиевский собор» состоялось представление альбома «Защитник и праведник земли русской: в поисках образа», посвященного изображениям Александра Невского в произведениях XIX века из собрания музея. Издание с иллюстрациями крупного формата посвящено 800-летию со дня рождения государственного деятеля и полководца.
Елена Шаповалова, старший научный сотрудник музея, рассказала, что в Исаакиевском соборе находятся более десяти изображений князя. Прежде всего это бронзовая скульптура «Святой Александр Невский» Ивана Витали, украшающая южные наружные двери, а также три рельефных изображения того же автора на южных внутренних дверях. Они рассказывают о победе над шведами, отказе перейти в католичество и принятии монашества.
В главном иконостасе собора находится мозаичная икона, созданная по эскизу Тимофея Неффа. Первоначально художник изобразил Александра Невского в римских одеждах. Но по настоянию Николая I сменил их на алые княжеские. Еще одна мозаичная икона по эскизу Николая Майкова расположена в приделе Александра Невского. Там же размещены четыре росписи на темы жития святого кисти Петра Басина. Наконец, в плафоне главного купола находится изображение князя, написанное Карлом Брюлловым и Петром Басиным. Современники назвали его «работой на века».
В альбоме воспроизведения – эскизы росписей, которые хранятся в Русском музее, Музее Академии художеств, Вологодской картинной галерее, музее-усадьбе «Приютино». Впервые опубликован эскиз реставрации одной из росписей, сделанный в начале 1880-х годов художником Николаем Кошелевым, который и выполнил необходимую работу. Эскиз хранится в Нижегородском музее-заповеднике.
На четвертой странице книги помещен QR-код, загрузив который читатели могут услышать фрагменты «Всенощной» Чайковского, кантаты «Александр Невский» Прокофьева, специально записанные для данного издания концертным хором Петербурга под руководством Владимира Беглецова.
Нынешнее издание уже третье для музея в этом году, посвященное Александру Невскому. До этого вышли альбом «Воин. Миротворец. Молитвенник» с фотографиями интерьеров названных храмов, а также двухтомный сборник материалов всероссийской конференции, посвященной опыту изучения и сохранения культурно-исторического наследия, связанного с деятельностью Александра Невского. Конференция состоялась весной 2021 года в музее «Исаакиевский собор».
Материал опубликован в газете «Санкт-Петербургские ведомости» № 197 (7034) от 20.10.2021 под заголовком «Приближение к образу благоверного».
Материалы рубрики
Эрудиция: что это, зачем много знать и помнить в эпоху интернета
РБК Тренды разобрались, кому в XXI веке нужна эрудированность и знания в разных областях, если ответы на большинство вопросов можно получить в сети за несколько секунд
Что такое эрудиция
Эрудиция — разносторонние знания или глубокая осведомленность в различных областях. Во многих словарях в качестве синонимов эрудиции используют «знания», «образованность», «начитанность», «грамотность» [1].
Про умного человека говорят, что он эрудированный. Такие люди могут поддержать разговор на разные темы, вспомнить необычный факт, привести пример из истории.
Похоже на всезнайство? Не совсем. Эрудиты не стараются выглядеть умнее, чем они есть на самом деле, а их знания не поверхностны. По-настоящему эрудированный человек действительно понимает то, о чем он говорит.
Для тех же, кто похож на ходячую «Википедию», есть другое слово — гелертер [2]. Это тоже умные люди, но их знания чаще всего носят книжный характер. Часто они не способны сопоставлять факты и применять знания на практике. Гелертер, который увлекается историей, легко перечислит вам российских императоров в порядке правления, но вряд ли назовет причины провала восстания декабристов.
Чем эрудиция отличается от интеллекта
Если эрудиция произошла от латинского слова ēruditio (ученость, просвещенность), то интеллект происходит от intellectus (восприятие, понимание, мышление). То есть интеллект — это мыслительная способность, умственное начало человека [3].
Именно интеллект отвечает за то, насколько человек обучаем, может воспринимать и обрабатывать информацию. Можно сравнить интеллект человека с сосудом, а вот то, чем он будет наполнен — это уже эрудиция и знания.
Почему эрудицию критикуют
И хотя это слово не несет в себе смысловой иронии, эрудитов и саму эрудированность нередко высмеивают.
В 1918-м американский экономист и социолог Торстейн Веблен ввел термин «капитаны эрудиции» (captains of erudition) [5]. Так он называл руководителей образовательных учреждений, которые были умны и начитанны, но не обладали необходимыми качествами для управленцев.
Эволюционный психолог Паскаль Буайе из Вашингтонского университета в Сент-Луисе исследовал связь науки и эрудиции [6]. Он отметил, что если раньше знаний было достаточно, чтобы считаться специалистом в какой-либо области, сейчас — нет. Если раньше для шекспироведов обязательно было знать ранние сочинения драматурга, то теперь подобная эрудиция — не главный критерий.
Паскаль Буайе приводит и более жизненный пример: раньше, чтобы стать водителем лондонского такси, нужно было наизусть знать все улицы города и сотни маршрутов. С появлением приложений-навигаторов эрудиция кандидатов-водителей уже не так важна.
Буайе считает, что только эрудиции для современного ученого недостаточно, поскольку эрудиция — это не гипотезы или объяснения, а лишь описание. Большая часть информации (особенно в литературе и филологии) уже изучена и структурирована. В современном мире от ученых и исследователей больше ждут личного вклада в область, собственных мыслей и выводов.
Существуют ли критерии эрудированности
Критерии эрудированности заложены в различных определениях этого слова. Есть общие черты эрудиции, которые встречаются почти во всех языках:
- глубокие, основательные познания;
- разносторонняя образованность;
- умение использовать знания на практике;
- понимание изученной информации.
Гиперболизированный образ эрудита схож с описанием «универсального человека» или полимата. [7] Понятие появилось в начале XVII века для описания людей, которые достигли успехов сразу в нескольких областях.
Один из самых ярких полиматов в истории — Леонардо да Винчи. Он написал шедевр мировой живописи «Мона Лиза», спроектировал купол Миланского собора, изобрел прототип парашюта, дельтаплана и даже танка, сделал более сотни анатомических рисунков, а еще, по отзывам его друзей, великолепно готовил.
Российский культуролог Андрей Флиер отмечает, что выдающиеся личности в эпоху Просвещения имели тяготение к эрудированности в области национальной истории, литературы, искусства и мифологии: «То, что мы сегодня называем «развитой гуманитарной культурой личности», складывалось именно под влиянием идей «национального романтизма» и основывалось прежде всего на хорошем знании истории (как ни парадоксально, не столько в ее профессиональном научном, сколько в художественно-литературном изложении)». [8]
Еще один пример полимата — Мария Склодовская-Кюри, единственная женщина, удостоенная Нобелевских премий за разные науки — физику и химию. И да Винчи, и Кюри — гении и эрудиты, но их интересы не совпадают.
Не существует списка наук, которые «настоящий» эрудит должен изучить и разбираться в них. Поэтому даже если человек не знает (или не помнит), кто написал «Отцы и дети», чем знаменита фамилия Джугашвили и в каком веке правил Петр I — это не значит, что он не эрудирован*. Возможно, его область интересов — не история или литература.
Самый знаменитый детектив в мире Шерлок Холмс из книг Конан Дойля не обладал энциклопедическими знаниями в астрономии и не знал, что Земля вращается вокруг Солнца. Зато он великолепно разбирался в химии и мог отличить грязь на Риджент-стрит от грязи на Пикадилли: умел применять знания на практике. И вряд ли кто-то назовет Шерлока Холмса не эрудированным человеком
При этом в современности часто пытаются развивать эрудицию у школьников. Академический директор онлайн-школы «Фоксфорд» Екатерина Латыпова считает, что эрудированным можно называть ребенка, который для своего возраста понимает значительно больше сверстников в одной или нескольких областях знаний.
Екатерина Латыпова, академический директор онлайн-школы «Фоксфорд»:
«Очень важно, что знания ребенка — это не просто результат запоминания большого количества фактов. Эрудированность означает понимание и умение объяснить причинно-следственные связи между объектами изучения. Дети любопытны от природы. Когда взрослые знают, что именно интересует их ребенка, они легче смогут развивать его эрудированность, отталкиваясь от интересной ему области знаний».
Зачем нужна эрудиция
В эпоху интернета, когда на большинство вопросов можно получить ответы за несколько секунд, кажется, что быть эрудированным не так уж и нужно. Но эрудиты не только много знают, но и применяют знания на практике: с этим навыком интернет уже не поможет.
Эрудиты могут стать ценными специалистами для новых междисциплинарных наук, где профессионал должен знать сразу несколько классических дисциплин. Например, в середине XX века появилась когнитивистика — наука на стыке шести наук, среди которых психология, нейрофизиология и лингвистика. Специалисты когнитивной науки изучают человеческий мозг и мышление. Профессионалы в этой области так или иначе обладают знаниями из нескольких областей науки, что делает их востребованными междисциплинарными специалистами.
Эрудиция актуальна для тех, кто хочет освоить профессию будущего. Биоэтик, дата-журналист, трендвотчер — эти специалисты не ограничены узкими знаниями и совмещают информацию из разных областей.
Многие онлайн-школы уделяют внимание развитию эрудиции у детей, но единой методологии проектирования подобных курсов не существует.
Екатерина Латыпова:
«Раньше дети собирали мини-город из Lego и были ограничены количеством деталей, а сегодня они создают целые миры в Minecraft, где есть огромное пространство для развития ребенка. Раньше дети читали энциклопедию в картинках, а сегодня смотрят фильм NatGeo, самостоятельно создают и печают 3D-модели живого мира, отправляются в виртуальные экскурсии с Google.
Большинство авторов курсов сегодня придерживаются позиции, что более эффективное обучение там, где ребенок занимает проактивную позицию, то есть самостоятельно исследует, открывает новое знание, а не получает его готовым «на блюдечке».
Стоит аккуратно относиться к лозунгам, что, благодаря какому-то продукту, ребенок запомнит 50 историй, 10 художников и несколько географических открытий. Эрудированность отражает не только количество фактов, которые запомнил ребенок, но и качество этого знания: может ли он применить его в другой ситуации, понимает ли он причинно-следственные связи».
Как развивать эрудицию у детей
Екатерина Латыпова для развития эрудиции у детей рекомендует много читать, смотреть познавательные видео, конструировать и обсуждать увиденное с ребенком.
Коммуникация. Обсуждайте с ребенком новое знание: что было понятно, а что нет. Не останавливайтесь на запоминании фактов, это быстро забудется, если в голове ребенка не возникнут связи и ассоциации с другими знаниями.
Критическое мышление. Задавайте открытые вопросы о новом знании, придумывайте задачи, в которых оно могло бы пригодиться. При этом у задачи необязательно должно быть единственное решение.
Коллаборация. Создавайте мини-учебные ситуации в группе детей с участием взрослого. Дети через общение и сотрудничество смогут находить ответы на сложные для их возраста задачи, а также приобретать новый социальный опыт. Любое сотрудничество учит умению договариваться, распределять роли и вместе достигать результата.
Креативность. Фантазируйте, где может пригодиться новое знание.
Мать из Уфы объяснила раздачу своих детей через Интернет
Если кто-то приготовился бросить в Викторию камень, то пусть сначала выслушает ее историю. А потом оглянется на наш мир, в котором матери теряют материнский инстинкт…
Здоровье у маленького Степы (имя изменено), как следует из интернет-сообщения Виктории, 8/9 по шкале Апгар. Он прошел полное медицинское обследование: «есть проблемки, но не критичные», пишет мама. И добавляет: «Родился 9.07.2021 в 10.54 по местному (Уфа, Республика Башкортостан, Россия). По дизайну человека МГ 3/5, Солнце в знаке Рака. Принимал настройки Лилла Перла и Кундалини Рейки (духовные учителя — Е.С.) в утробе. Очень мощный по энергетике».
Интернет забурлил. Интернету только дай повод. Кто-то говорит, что Степу надо немедленно забрать от такой матери. Да хоть куда, хоть сразу в детский дом. А кто-то — что Виктория просто раскручивает свою страницу и прикалывается. Тем более по профессии, как написано, она — репетитор по математике, автор собственной методики для 5–11-х классов и к тому же писательница.
Кто-то предлагает составить заявление в правоохранительные органы о продаже ребенка. Но все дело в том, что Виктория его не продает, а отдает даром. Она подчеркивает, что деньги ей не нужны.
Но фотографии и видео Степа — хорошенький, как все малыши, сосет бутылочку, видна рука Вики, она ласково гладит сына по голове.
Постепенно люди, которые хейтят «мать-кукушку», а под постом — уже за тысячу комментариев, накидываются и друг на друга, лают, кусают, оскорбляют, если кто-то не согласен с чужой точкой зрения.
Тут же докопались и до предыдущего заявления, где Вика таким же способом искала родителей старшей дочке. И, представляете, нашла!
Сама Виктория никого не банит. Очень спокойно отвечает на все вопросы. Что даже удивительно, так как агрессия в комментариях зашкаливает. Девушка согласилась поговорить со мной и объяснить мотивы своего поступка.
— Я — Виктория, мне 33 года, у меня двое детей и инвалидность по психическому заболеванию. Ну да, у меня есть высшее образование и в родне много начальников, но им Степа точно не нужен. Мне трудно жить. Дело даже не в агрессии, хотя она тоже бывает. Я в быту вообще ноль. Для меня помыть ребенка — это проблема. Как развернуть, чтобы он не упал, как держать головку. Это было и когда я первую дочку родила. Мы с ней вместе жили, я ухаживала за ней как могла. И мне реально было страшно. Все шло к детдому, и тогда я опубликовала на своей странице пост о том, что ищу родителей своей девочке.
Тот первый пост:
«Ляля (имя изменено) ищет маму и папу. Это необычайный и очень нежный ребенок.
История ее такова, что папа был женат, а мама помолвлена, и, когда все всё узнали, обе свадьбы расстроились.
Папа (талантливый химик-технолог) ребенка не признает.
Бабушкам и дедушкам, дядям и тетям она не нужна.
Автор поста — сама мама, которая понимает, что лучше самой найти любящую семью, нежели ждать, что ребенок попадет в пасть опеки и в ад детдома».
По словам Виктории, на момент расставания Ляля умела считать до 20, знала цвета, животных, некоторые буквы. По характеру очень нежная, добрая, любящая. Знак зодиака — Рыбы.
«Часто говорит: «я — киса», «я — рыбка». Любит мультики и знает некоторые иностранные слова. Бывает, смотрит мультик и хихикает. Любит кошек.
Обязательное условие для новых родителей — два дня в неделю родная мама проводит с Лялей.
И на прощание подписала фото:
«Лялька — моделька. Лялька — сарделька».
Вся страница Виктории до того момента, как она, по ее словам, отдала дочку, полна ее фотографиями и нежными подписями.
Этот рисунок Виктория посвятила сыну.— Вы видитесь сейчас? — спрашиваю я Викторию.
— К сожалению, нет. Мне сказали, что так для всех будет лучше. Буквально через два часа после того, как я опубликовала тот пост, отозвалась семья. У них уже были собраны все документы. Сначала они оформили опеку, а потом дочку удочерили. Я хотела ее видеть, но как-то решили, что у ребенка должна быть одна мама. И психологи тоже посоветовали нам не общаться больше.
— Сколько ей?
— В марте будет пять. Она забывает уже меня, иногда, редко, ей напоминают, но так не спрашивает.
— Тоскуете?
— Конечно, но я же понимаю, что со мной что-то не так. Мне страшно жить одной или с ребенком. В основном я рассчитываю только на себя, и в своей семье я как паршивая овца.
— У вас есть родители? Где вы живете?
— Я живу с папой и мачехой в двухэтажном доме. Они на первом, я на втором этаже. В принципе я не могу сказать, что они ко мне плохо относятся. В детстве мачеха ухаживала за мной, причесывала, стригла ногти. В школе помогала с уроками. Я училась на «пятерки».
— А родную маму вы не помните?
— Она умерла, когда мне было годика три, — заминается Вика. — Она умерла от рака. Все, что я помню, как несу ей букет одуванчиков. Или это были ромашки… Но я не знаю, сон это был, или явь, или моя мечта. Возможно, это был последний день ее жизни и поэтому так врезался в память. Через два года я заболела, а серьезно душевное заболевание манифестировало в 2013-м, когда я набрала кредитов на миллион — и их нечем было отдавать. Я очень переживала.
— Многие недоумевают, зачем с таким бэкграундом вы решили родить второго ребенка, чтобы и его тоже отдать?
— Я решилась на второго ребенка, так как хотела доказать самой себе, что все-таки смогу стать хорошей матерью. В роддоме я училась пеленать Степу, и все это мне давалось очень тяжело. Но мне говорили, что я молодец, что я справляюсь. А потом мне стало плохо, и меня увезли в больницу, а его — в Дом малютки. С тех пор мне его не отдает опека, и я понимаю, что, скорее всего, меня лишат родительских прав. Еще, конечно, из-за Ляли. То, что я лишена прав на старшую дочь, это тоже влияет на отношение ко мне. Сейчас меня к нему вообще не пускают, даже передать памперсы не могу. Но я обязательно приду в суд, когда будет решаться наш вопрос. Я точно знаю, что Степа со мной не останется, он — мальчик, и ему нужен папа как пример мужчины.
— А его родной отец?
— Ну, у него ветер в голове, и он не готов стать отцом, хотя он хороший, и я никогда ничего плохого не скажу про отцов своих детей.
— На волне того хайпа, который начался в Интернете вокруг вашего поста, вам уже написал кто-то?
— Сейчас со мной связались девять семей, есть среди них и многодетные. Позвонил один педофил и долго сопел в трубку. Бывает, звонят тролли, а еще журналисты. Так я за один день стала популярна. Я журналистам очень благодарна, потому что мне нужны шумиха и огласка, чтобы найти своему сыну самых лучших родителей. Это все, что я могу для него сделать.
— Вы любите его?
Вика отвечает, не задумываясь: «Я очень люблю его. Космически. Обожаю его! Я не выбросила его в мусорку после рождения, не сделала аборт… Я и отдаю его, потому что люблю. Он мне очень нужен. Просто я не могу быть нормальным родителем, и так для него будет лучше. А я буду счастлива, если он будет счастлив».
У нас в России, в отличие от США, не предусмотрен поиск приемных родителей родным родителем, даже если мать отдает новорожденного бесплатно. А уж если за деньги, и это становится известно, то такой поступок грозит уголовным делом за «торговлю людьми».
Но вот немного фактов из новейшей истории.
Последние несколько лет в России просто эпидемия убийств новорожденных матерями. Причем понятно, что многие женщины делают это в помрачении рассудка, в пьяном или наркотическом угаре, от отчаяния и невозможности найти выход в, как им кажется, безысходной ситуации. Бедность, родовая депрессия, плохие отношения с отцом ребенка, болезнь, физическая или душевная…
Учительница в Подмосковье осенью прошлого года задушила сына колготками. Когда я как правозащитник навестила ее в СИЗО, она сидела вся черная и не понимала, что вообще происходит, на каком она свете.
Молодая мать в Самаре в июне уже этого года, решив наказать дочку, высунула ее из окна, держа за одну маечку. Маечка порвалась — девочка разбилась насмерть.
Во Владивостоке молодая мама также выбросила сына в окно.
Под Волгоградом мать недавно убила новорожденного ребенка, потому что он «слишком много кричал и раздражал ее».
Это не матери сходят с ума, это наш мир постепенно сходит с ума. И прежде всего, получается, это отражается на материнском инстинкте.
На фоне всего этого то, что пытается сделать Виктория, как ни странно, на мой взгляд, выдает в ней хорошую и ответственную мать. Хотя, несомненно, девушка ходит по краю. И едва ли 1% пусть не понял, но хотя бы пожалел Вику. Услышал ее крик о помощи. 99% ее готовы судить страшным судом. Многие читатели тут же сообщили о посте Виктории в органы опеки, на что получили ответ: «Мать на выбор приемной семьи не будет оказывать влияния. Ребенок в базе данных под опеку — с сентября».
Виктория надеется, что если ее вопрос решится положительно, то ей разрешат навещать сына, хотя и понимает, что это все на усмотрение новой семьи: «Возможно, его родители не захотят, чтобы я была где-то рядом».
Она только попросила, чтобы я не публиковала ее собственную фотографию: «Мне же еще надо жить и работать». От своего решения она отказываться не собирается.
КОММЕНТАРИЙ «МК»
Софья ДРОБЯЗКО, юрист Патриаршей комиссии по вопросам семьи, материнства и детства:
— Комментировать данную ситуацию довольно сложно в силу ее деликатности и специфики этой сферы. Можно сказать следующее: легального способа передать новорожденного ребенка от биологической мамы приемным родителям не существует. Те способы легализации, которые используются при такой передаче, обычно обговариваются еще на этапе беременности. Будущий папа сразу вписывается в свидетельство о рождении, затем биологическая мама отказывается от своих прав, и ребенок усыновляется супругой мужчины, записанного отцом. Такие ситуации бывают, но так, чтобы передать напрямую, такое по закону невозможно.
В данном случае судьбу ребенка должны решать органы опеки и попечительства, которые приобретают полномочия по уходу и воспитанию за ребенком, лишенным родительского попечения. Как я вижу, малыш уже передан в Дом малютки, речь идет об ограничении или лишении мамы родительских прав.
Поэтому вопрос об устройстве ребенка в семью будет решаться также органами опеки. Совпадет ли их мнение с мнением мамы о «хороших руках», сказать сложно, так как опека будет предъявлять конкретные требования для таких семей, а не пожелания, которые придумала и высказала мама.
Так что ее надежда на то, что ребенок может избежать «ужасов детдома», к сожалению, не оправданна.
Кроме того, такая незаконная передача из рук в руки может нести риски возмездности, то есть того, что мама будет просить деньги за ребенка, или новые родители будут предлагать их, в этом случае речь пойдет о торговле людьми, и тут возникает состав преступления.
В данной ситуации мы знаем, что происходит, только со слов самой матери, мы не знаем мнения ее родственников, вполне возможно, они готовы взять на себя заботу о мальчике и не разлучать его с матерью, которая в силу своего заболевания не может осуществлять свои родительские обязанности, но хочет находиться и быть рядом.
Радуется, как ребенок: дом на таежной заимке Агафьи Лыковой восстановили после пожара
С виду – обычный деревянный домик, примостившийся на крутом склоне у реки Еринат в Хакасии… А для Агафьи Лыковой в нем – целая жизнь. Построенный еще при ее отце, хранил семейные иконы и старые книги, письма и дорогие сердцу вещи. Выстоял в самые тяжелые времена, лютые холода.
Не вынес одного – конвейера пришельцев с большой земли. Ведь с недавних пор в глухой таежный угол к бабушке потянулись «гости из инстаграма». Одного из них – 37-летнего блогера вместе с его девушкой Агафья, добрая душа, даже пустила переночевать — в тот самый домик. А вскоре ветхая постройка полыхнула, как спичка. Все произошло поздно вечером 7 сентября.
Каким ударом это стало для Агафьи, остается только догадываться. Но спустя без малого два месяца пришла добрая весть: пострадавший от огня дом восстановили всем миром, стал лучше прежнего! Об этом рассказал «Комсомольской правде – Красноярск» директор заповедника «Хакасский» Виктор Непомнящий.
Агафья Лыкова и Виктор Непомнящий. Фото: предоставлено заповедником «Хакасский»
Год особый
Агафья Лыкова считается самой известной отшельницей в мире – благодаря журналисту «Комсомольской правды» Василию Пескову. Много лет назад он открыл всем историю семьи затворников-староверов, бежавших в тайгу от цивилизации.
Родные Агафьи давно умерли. И с 1988-го она живет одна. В свои 77 лет целыми днями хлопочет по хозяйству. Когда сама управится, а когда помощники подсобят, волонтеры или инспекторы заповедника. Отбор к ней строгий, в заповедник «нелегалов» стараются не пускать, но те все равно находят лазейки.
Впрочем, нынешний год оказался для Карповны необычным. Ей «подарили» новую избу – светлую, просторную, настоящие хоромы. Ее возвели при поддержке мецената и общественного деятеля Олега Дерипаски – как сюрприз для бабушки.
Ведь домик уже покосился, сильно дымила печка. Менять ее было нельзя, слишком уж ветхая избенка. Подумали и решили: нужна новая изба.
Но как ее построить? В заповеднике лес валить запрещено. Тогда нашли оригинальный выход: дом сложили в Абакане! Потом пронумеровали бревна и разобрали. Затем доставили на базу отдыха (это в 250 километрах от заимки). И оттуда – перебрасывали аэролодками – на место. Поскольку те могли «взять» не больше полутора тонн за раз, пришлось сделать 18 рейсов.
И вот весной Карповна отметила новоселье – квасом и компотом. Поздравить ее и освятить новое жилище прилетел сам Глава Русской Православной Старообрядческой церкви, Митрополит Московский и всея Руси Корнилий.
Теперь все новенькое
Сколько было радости, и вдруг такое, на заимке вспыхнул пожар. Говорили, блогер из Красноярска, оставшийся на ночевку, затопил печь, но тут занялась крыша. Официальная версия такая: перекалилась печная труба. Кто и когда ее менял…
Понятно, место удаленное, помощи ждать неоткуда. К счастью, пожар удалось потушить своими силами, подсобили живущие здесь волонтеры. Они же подали сигнал – по спутниковой связи. И уже утром к Агафье выдвинулся вертолет, а на его борту – спасатели, представители заповедника, врач.
Было установлено: у домика полностью сгорела крыша (это 30 «квадратов»), серьезно пострадала одна из стен, задело еще две хозяйственных постройки. Люди и животные (у Агафьи козы, собака, кошки) уцелели.
Конечно, отшельница тревожилась, как обойдется без «тятиного дома», ведь в холода она держит в нем козочек. Благо, решить проблему удалось довольно быстро.
— Наконец дом отремонтировали! – продолжает Виктор Непомнящий. — И внутри, и снаружи, и крыша перекрыта, и труба новая! Заходи – живи, только порядок надо навести. И материалы, и строителей забрасывали на вертолете – бизнес помогал. По-другому никак. Ведь река обмелела, и по воде на «моторе» теперь не дойти, только пешком или по воздуху.
Подчеркну, дом восстановили сообща, несмотря на все сложности и препятствия. Чуть позже запланированного срока, но успели. Спасибо всем, кто оказал содействие: это Митрополия Русской Старообрядческой Церкви — и лично иерей Игорь Мыльников, Николай Седов (сын геолога, который много лет помогал Агафье на заимке). Особые слова благодарности – предпринимателю и меценату Олегу Дерипаске — за постоянную поддержку, а также директору нацпарка «Сайлюгемский» Денису Маликову и бизнесмену Али Узденову.
Молится за нас
«Новому старому» дому Агафья радовалась, как ребенок. Ведь впереди зима, самое сложное время. Кстати, пока все волонтеры с заимки выехали. Сейчас Митрополия готовит нового помощника, это будет один из старых знакомых Карповны.
— А то пора предстоит нелегкая, — говорит директор заповедника. – Нынче грязь, слякоть, надо за хозяйством смотреть. Снег еще не лег, пока еще тонкий. Что с медведями? Больше на заимку не захаживают, не беспокоят. А потом начнется — зима, пурга, надо таскать дрова, воду (а это далеко), чистить снег. Да, все, что она просила, мы завезли. Продукты, корм скоту, что-то по мелочам…
Какие еще новости у Агафьи? Недавно к ней прилетал доктор с Алтая, визит оплатили меценаты.
— И вот вердикт: общее состояние хорошее. Даже проверили на ковид – ничего нет, сатурация хорошая, легкие чистые. Разумеется, о пандемии Агафья знает. Я, когда был у нее, пытался намекнуть: «Может, пока гостей не принимать? Повременим, а то времена опасные»? Но она настаивает на своем. Мол, без справок гостей сюда не допускают. Я, говорит, все об этой болезни знаю, пусть приедут – помогут. У нее свой подход – молиться. За себя и за нас.
Сотрудники заповедника «Хакасскиий» задержали блогера из Красноярска, по вине которого мог случиться пожар в старом доме отшельницы Агафьи Лыковой. Эту информацию подтвердили журналистам КП-Красноярск сотрудники заповедника. (Подробнее)
Агафья Лыкова переехала в новый дом: новоселье отметили квасом и компотом
За судьбой Агафьи Лыковой следят в нашей стране многие и делятся ровно на два лагеря: одни считают, что таежную отшельницу нужно силой увезти на Большую землю, чтобы не тратиться на помощь, другие категорически против и уверены, что важно оставить ее там, где она привыкла, и всячески ее поддерживать, ведь это и есть милосердие (подробнее).
«Помогать ей – это и есть милосердие»: Агафье Лыковой построили новую баню и печь
2021 стал для знаменитой отшельницы, 77-летней Агафьи Лыковой годом больших, — да, сказать больше, невероятных перемен. Она переехала в большой новый дом из полуразвалившейся избушки, построенной еще ее отцом. Но на этом новшества не заканчиваются. (Подробнее)
Первым о семье отшельников рассказал легендарный журналист «Комсомолки» Василий Песков:
Вся страна зачитывалась семейной робинзонадой Лыковых. Газетный сериал «Таежный тупик» растянулся на десятки лет. Единственный случай в советской, да и российской журналистике, если не в мировой. До тяжкого инсульта в 2009 году Василий Михайлович ежегодно летал к своим героям. Не только описывал их житье-бытье на радость читателям «Комсомолки», но и помогал продуктами, одеждой, утварью… Но и позже, до самой смерти в 2013 году Василий Михайлович регулярно делился с нашими читателями весточками от Агафьи с таежной реки Еринат. Газета продолжает эту традицию, не забывает 72-летнюю отшельницу… (Подробнее)
Прокудин не обманул. Погода к нам, и правда, была благосклонна. Поэтому, переждав день, мы, наконец-то, отправились к Агафье. Путь до Ерината и для подготовленного человека – серьезное испытание. Для нас же – встряска, которая запомнится на всю жизнь. (Подробности)
«Визит вышел за рамки плана, что ждет группу, неизвестно»: журналисты «Комсомолки» пробиваются к Агафье Лыковой
Всё это время они проведут на кордоне заповедника. Дорога до кордона заняла более двух дней и была усложнена погодными условиями в виде постоянно идущего снега. Кроме этого, в условиях низкого уровня воды инспекторы были вынуждены вручную перетаскивать лодку. (Подробности)
Вообще Агафья говорливая такая оказалась, но много не понять, язык своеобразный. Все дела, все беды, — не замолкая. «Коза, жалуется, Звездочка, надоела она мне, хоть пристрелите ее. Сломала калитку, ушла, а у меня там медведица шарится».
Совсем недавно «Комсомольская правда»-Красноярск рассказывала о том, что в этом году свою помощь таежной отшельнице предложил известный в Хакасии меценат и общественный деятель Олег Дерипаска. В этом году вместе с продуктами и разными нужными в быту вещами ей привезли новую печку. Однако всем понятно, что это лишь временное решение проблемы, поскольку изба очень ветхая и давно нуждается в ремонте. (Подробности)
За судьбой Агафьи Лыковой следят в нашей стране многие и делятся ровно на два лагеря: одни считают, что таежную отшельницу нужно силой увезти на Большую землю, чтобы не тратиться на помощь, другие категорически против и уверены, что важно оставить ее там, где она привыкла, и всячески ее поддерживать, ведь это и есть милосердие. Сама Агафья Карповна этот вопрос давно решила. И продолжает жить в верховьях Абакана. Но женщине уже 74 года, без помощника и без помощи она обходиться уже не в силах.
На таежной заимке Агафьи Лыковой перед новым годом побывали гости с «большой земли». Проведать 74-летнюю отшельницу приехала ее старая знакомая – алтайский фотограф Светлана Казина. Прибыла с подарками – теплым бельем, холстяными мешочками для трав, свечками…
Они на одной волне – общаются очень доверительно.
Википедия, Лживая энциклопедия — Pro Se Blog Джона Кларка
Шторм в стакане воды, который я случайно начал, теперь превратился в настоящую гору Этна. Я делаю это для известных людей во всем мире, и меня считают одним из них.
Как я уже сказал, известных людей отговаривают редактировать статьи, написанные о них другими. Ссылки из опубликованных источников предоставлены участниками WP, и я утверждал, что выбор этих ссылок является необъективным и все время противоречит их собственному набору правил.Эти редакторы пересекают границы «Сохранять нейтральную точку зрения», «Никогда не заявлять о праве собственности на статью» и «Избегать конфликта интересов». Понятно, что тема статьи о живом человеке или мертвом человеке лежит в области «Биографии». Такова была статья о моем старом друге Джоне Ле Мезурье, наиболее известном по британскому сериалу «Отцовская армия», которую, я думаю, повторили на BBC в Америке.
Меня обвинили в манипуляциях, угрозах, рекламе, лжи и напрасных заявлениях.Они пытались разоблачить меня насмешками и оскорблениями и заблокировали меня от редактирования, чем я с радостью занимаюсь уже три или четыре года, создавая безобидные статьи другого типа. Однако я все еще могу выразить свое мнение на моей странице обсуждения, где я даю ссылку на это. Это то, что сказал SchroCat (псевдоним, скрывающий личность), чтобы доказать, что я виновен во всех вышеупомянутых грехах. Он опубликовал следующее:
Потратив часть своего личного времени на то, чтобы добраться до Британской библиотеки из-за нелепых вопросов о том, надежен ли уважаемый и проверенный биограф, я очень рад сообщить, что нашел в старых выпусках Radio Times сообщает, что в 20:15 26 ноября 1946 года в программе BBC Light был показан 10-й эпизод «Просто Уильяма», закончившийся в 20:35.Впоследствии это было повторено на той же длине волны в 16:30 1 декабря 1946 года.
Clark, слухов нет, так что прекратите троллить. Я предоставил достаточно информации. Если вы хотите увидеть это в черно-белом цвете, купите книгу Макканна. Сканирование записей микрофиш в BL невозможно: я спросил, и мне сказали, что мне придется передать их в раздел раритетов для электронной обработки. Вы хотите это сделать, тогда вы сможете оплатить счет. Если вы слишком скупы для этого, поищите в другом месте.Я связался с автором, чтобы спросить его: он дал ответ. Если вы также хотите услышать это напрямую от него, я предлагаю вам связаться с ним напрямую. Если нет, то вам придется [[WP: AGF]]. Если это не для вас, то обратитесь к надежным источникам и попросите их принять решение по этому вопросу. Меня не волнует, во что вы хотите верить или не верить, ваше бессмысленное троллинг по этому поводу вышло далеко за рамки любого нормального или естественного поведения. — [[Пользователь: SchroCat | SchroCat]] ([[Обсуждение пользователя: SchroCat | обсуждение]]) 09:03, 29 апреля 2013 г. (UTC)
Затем я связался с Грэмом Макканном, автором книги, из которой была получена информация, и спросил о связи между Джастом Уильямом и Ле Мез.Он подтвердил мне, что «информация взята из письменных архивов BBC и личных файлов Ле Мезурье».
Следовательно, я более чем счастлив, что то, что мы имеем в этой статье, является точным отражением того, что доступно в надежных источниках, и что эти источники предоставили архивную информацию из безупречных источников.
К счастью, я являюсь членом Общества Справедливого Уильяма, которого эти ребята считают ненадежным источником, и один из их добровольных историков по имени Роберт Киркпатрик пошел в библиотеку, чтобы узнать, говорит ли Википедия правду. , или позволяя ложь.Я не могу загрузить это в Википедию, потому что я заблокирован. Я скачиваю его здесь, на своем веб-сайте, чтобы доказать, что ложь о людях разрешена в Википедии. Он сказал мне это, прежде чем предоставить доказательства того, что ложь можно найти в Википедии. Он сказал
Перед вами копия страницы из Radio Times, на которой показан 10-й выпуск передачи Just William 26 ноября 1946 года. Как видите, здесь нет упоминания о Джоне ле Мезурье.
Эпизод повторился в воскресенье, 1 декабря 1946 г. — актерский состав не разглашается.
Итак, мы все согласны с тем, что этот парень из Википедии прав, в том смысле, что в этот день БЫЛ эпизод на JW (что в любом случае никогда не вызывало сомнений), но если он говорит, что в нем был Джон ле Мезурье и что Radio Times доказывает тогда он на 100% неправ.
Как я уже сказал, я лично подозреваю, что биограф Ле Мезурье ошибся (в конце концов, мы все делаем ошибки — и в любом случае, возможно, это был сам Ле Мезурье) и что ссылка должна была быть на прямая трансляция спектакля из театра Гранвиль 23 декабря 1946 года.
PS Я должен добавить, для точности, что мне не разрешили делать фотокопию страницы из Radio Times в Британской библиотеке, так как она была слишком большой (то есть больше A4). Я мог бы заплатить за его сканирование и копирование, но это заняло бы 24 часа. Так что я пошел в Вестминстерскую справочную библиотеку и смог взять фотокопию из переплетенных томов Radio Times.
Могу, конечно, заверить, что оба экземпляра были идентичны! Надеюсь, это поможет, и вы сможете вернуть себе жизнь !!!!! »
Роберт
Вот видимый скан записи Radio Times:
Я надеюсь, что Джимбо Уэльс воспользуется этой информацией и предпримет шаги, чтобы освободить возможность свободного редактирования заметных людей вместе с другими участниками.И есть по крайней мере 3 из этих лживых псевдонимов, которым следует навсегда запретить вносить вклад в то, что в остальном является прекрасной энциклопедией.
№ 2604: Сестра Джона Дрейпера
Сегодня сестра Джона Дрейпера. Инженерный колледж Хьюстонского университета представляет эту серию о машинах, которые делают нашу цивилизацию бегут, и люди, чья изобретательность создала их.
Фотография молодой женщины смотрит на меня с этого вековая журнальная статья о фотографии. Ее зовут Дороти Кэтрин Дрейпер и фотография были сделаны ее братом Джоном около 1840 года. Журнал называет это первым фотографическим портретом. Может быть. Это конечно первое портрет женщины с открытыми глазами.
Джон Дрейпер был 29-летним профессором химии в медицинской школе Нью-Йоркского университета.Он родился в Англии, окончил там колледж и женился, когда ему было всего 20 лет. Год спустя вся его большая семья переехала в Вирджинию, где он собирался взять преподавательская работа. Но когда он приехал, работа исчезла.
Итак, он самостоятельно проводил исследования в области химии, опубликовал статьи, затем поступил и закончил медицинский вуз. Все это время сестра Дороти, работая художницей, помогли поддержать его и его жену. И это окупилось.В 1837 году Нью-Йоркский университет предложил ему профессура.
Луи Дагер опубликовал свой новый дагерротипный процесс два года спустя, и Дрейпер ухватился за это. Он сразу увидел, как этот метод может быть адаптированным к портретной фотографии. И вот как это преследующее фото его сестры возникла.
Draper внес много улучшений в фотографические процессы. Он смог создать первая фотография Луны, показывающая особенности ее поверхности.Тем не менее, его интерес был в фотохимии. Фотография была лишь боковой панелью к этой работе.
Дрейпер был соавтором первого основного закона фотохимии — Закон Гроттуса-Дрейпера. Он говорит, что свет должен поглощаться системой, чтобы вызвать фотохимическое изменение. Он также дал нам так называемую точку Дрейпера . Он понял что любой объект, независимо от материала, светится тускло-красным при температуре 977 o F.
Это было важно для эволюции квантовой механики. Макс Планк дал нам свое квантовая теория излучения полвека спустя. В нем он использовал тот факт, что При заданной температуре все тела излучают пиковую энергию на одной и той же длине волны. Дрейпер точка — это просто температура для длины волны тускло-красного цвета.
Draper сделал гораздо больше. И он стал президентом Нью-Йоркского университета, основателем его Медицинский факультет, автор важных учебников химии, историк, философ наука … — все после того, как он подарил нам запоминающийся портрет своей сестры.
Она сидит, не мигая, на 65-секундной выдержке — все еще как сфинкс в кружевах и капот. Дрейпер посыпала лицо белой мукой, чтобы усилить контраст. (Он сделал не прибегать к фотошопу. Результат действительно сработал. Лицо Дороти на удивление естественное.
К 1906 году мой журнал смог опубликовать гораздо более продвинутые фотографии — фотографии кометы и прыгающего тарпона.Он показывает набор фотографий местности в Канадских Скалистых горах, а затем составленная по ним топографическая карта. Но после всего этого мои глаза нарисованы назад к любви, вложенной в эту фотографию Дороти — еще молодой и почитаемой, два столетия спустя.
Я Джон Линхард из Хьюстонского университета, где нас интересуют изобретательные умы Работа.
(Музыкальная тема)ЧАС.В. Ланье, Чудеса фотографии. Работа мира , Vol. XI, № 3, Январь 1906 г., стр. 7163-7173.
См. Также статью в Википедии о Джон Уильям Дрейпер и этот сайт с дополнительными биографическими материалами.
В тексте я обхожу некоторые вопросы. Draper Point — это частный случай более общего Соотношение Люммера-Прингсхейма 1899 г. Они показали, что в точке максимального излучения черного тела произведение длины волны на температуру равно 0.2898 см-К. Планк использовал этот факт, чтобы установить значение его постоянной Планка. В то время как соотношение Люммера-Прингсхейма строго верно для идеального термически «черного» тела, он хорошо работает для большинства обычных материалы тоже. См. Подробности в C. L. Tien and J. H. Lienhard, Statistical Thermodynamics . (Вашингтон, округ Колумбия: Hemisphere Pub. Corp. 1979.): Sects. 4.1 и 4.2
Изображения: Дороти Дрейпер из статьи The World’s Work.Джон Дрейпер любезно предоставлен Википедией Commons. График Люммера-Прингсхайма ниже от Тьена и Линхарда.
Ниже: данные Люммера и Прингсхайма для спектра излучения черных тел как функции длины волны. Геометрическое место максимумов (пунктирная линия) будет включать точку Дрейпера. на длине волны 3,6 мкм. Он появился бы на этой строке, если бы его продлили в сторону в правом нижнем углу графика.Двигатели нашей изобретательности Авторские права © 1988-2010, Джон Х.Линхард.
Второй закон движения Ньютона
Первый закон движения Ньютона предсказывает поведение объектов, для которых все существующие силы уравновешены. Первый закон — иногда называемый законом инерции — гласит, что если силы, действующие на объект, уравновешены, то ускорение этого объекта будет 0 м / с / с. Объекты в состоянии равновесия (состояние, при котором все силы уравновешены) не будут ускоряться.Согласно Ньютону, объект будет ускоряться только в том случае, если на него действует чистая или неуравновешенная сила. Присутствие неуравновешенной силы ускоряет объект, изменяя его скорость, направление или одновременно скорость и направление.
Второй закон движения Ньютона относится к поведению объектов, для которых все существующие силы не сбалансированы. Второй закон гласит, что ускорение объекта зависит от двух переменных — чистой силы, действующей на объект, и массы объекта.Ускорение объекта напрямую зависит от чистой силы, действующей на объект, и обратно — от массы объекта. По мере увеличения силы, действующей на объект, ускорение объекта увеличивается. По мере увеличения массы объекта ускорение объекта уменьшается.
БОЛЬШОЕ УравнениеВторой закон движения Ньютона можно формально сформулировать следующим образом:
Ускорение объекта, создаваемое чистой силой, прямо пропорционально величине чистой силы в том же направлении, что и чистая сила, и обратно пропорционально массе объекта.
Это словесное утверждение можно выразить в виде уравнения следующим образом:
a = F сетка / мПриведенное выше уравнение часто преобразовывается в более знакомую форму, как показано ниже. Чистая сила равна произведению массы на ускорение.
F net = m • aВо всем этом обсуждении упор был сделан на чистую силу .Ускорение прямо пропорционально чистой силе ; чистая сила равна массе, умноженной на ускорение; ускорение в том же направлении, что и чистая сила ; ускорение создается чистой силой . СЕТЕВАЯ СИЛА. Важно помнить об этом различии. Не используйте в приведенном выше уравнении значение просто «какой-либо старой силы». Это чистая сила, связанная с ускорением. Как обсуждалось в предыдущем уроке, результирующая сила — это векторная сумма всех сил.Если известны все индивидуальные силы, действующие на объект, то можно определить результирующую силу. При необходимости просмотрите этот принцип, вернувшись к практическим вопросам в Уроке 2.
В соответствии с приведенным выше уравнением единица силы равна единице массы, умноженной на единицу ускорения. Подставив стандартные метрические единицы для силы, массы и ускорения в приведенное выше уравнение, можно записать следующую эквивалентность единиц.
1 Ньютон = 1 кг • м / с 2Определение стандартной метрической единицы силы определяется приведенным выше уравнением.Один Ньютон определяется как количество силы, необходимое для придания 1 кг массы ускорения в 1 м / с / с.
Ваша очередь практиковаться Сеть F = m • уравнение часто используется при решении алгебраических задач. Приведенную ниже таблицу можно заполнить, подставив в уравнение и решив неизвестную величину. Попробуйте сами, а затем используйте кнопки, чтобы просмотреть ответы.
| Чистая сила (н.) | Масса (кг) | Разгон (м / с / с) | |
| 1. | 10 | 2 | |
| 2. | 20 | 2 | |
| 3. | 20 | 4 | |
| 4. | 2 | 5 | |
| 5. | 10 | 10 |
Числовая информация в таблице выше демонстрирует некоторые важные качественные отношения между силой, массой и ускорением.Сравнивая значения в строках 1 и 2, можно видеть, что удвоение чистой силы приводит к удвоению ускорения (если масса остается постоянной). Точно так же сравнение значений в строках 2 и 4 демонстрирует, что уменьшение вдвое чистой силы приводит к уменьшению вдвое ускорения (если масса остается постоянной). Ускорение прямо пропорционально чистой силе.
Кроме того, качественную взаимосвязь между массой и ускорением можно увидеть, сравнив числовые значения в приведенной выше таблице.Обратите внимание на строки 2 и 3, что удвоение массы приводит к уменьшению вдвое ускорения (если сила остается постоянной). Точно так же строки 4 и 5 показывают, что уменьшение массы вдвое на приводит к удвоению ускорения (если сила остается постоянной). Ускорение обратно пропорционально массе.
Анализ табличных данных показывает, что такое уравнение, как F net = m * a, может помочь понять, как изменение одной величины может повлиять на другую величину.Какое бы изменение ни производилось в чистой силе, такое же изменение произойдет и с ускорением. Удвойте, утроите или учетверите чистую силу, и ускорение будет делать то же самое. С другой стороны, какое бы изменение массы ни производилось, с ускорением будет происходить противоположное или обратное изменение. Удвойте, утроите или учетверите массу, и ускорение составит половину, одну треть или одну четвертую от первоначального значения.
Направление чистой силы и ускорения
Как указано выше, направление результирующей силы совпадает с направлением ускорения.Таким образом, если известно направление ускорения, то известно и направление результирующей силы. Рассмотрим две диаграммы падения масла ниже для ускорения автомобиля. По диаграмме определите направление чистой силы, действующей на автомобиль. Затем нажмите кнопки, чтобы просмотреть ответы. (При необходимости проверьте ускорение предыдущего блока.)
В заключение, второй закон Ньютона дает объяснение поведения объектов, на которых силы не уравновешиваются.Закон гласит, что несбалансированные силы заставляют объекты ускоряться с ускорением, которое прямо пропорционально чистой силе и обратно пропорционально массе.
1. Определите ускорения, возникающие при приложении чистой силы 12 Н к объекту массой 3 кг, а затем к объекту массой 6 кг.
2. К энциклопедии прилагается чистая сила 15 Н, которая заставляет ее ускоряться со скоростью 5 м / с. 2 .Определите массу энциклопедии.
3. Предположим, что салазки ускоряются со скоростью 2 м / с 2 . Если чистая сила утроится, а масса — вдвое, то каково новое ускорение салазок?
4. Предположим, что салазки ускоряются со скоростью 2 м / с 2 . Если чистая сила утроится, а масса уменьшится вдвое, то каково новое ускорение салазок?
Новая фундаментальная физика? Необъяснимые явления из эксперимента на большом адронном коллайдере
Типичное событие LHCb полностью реконструировано.Частицы, идентифицированные как пионы, каоны и т. Д., Показаны разными цветами. Предоставлено: CERN, LHCb Collaboration
.Результаты, объявленные экспериментом LHCb в ЦЕРНе, выявили дальнейшие намеки на явления, которые не могут быть объяснены нашей текущей теорией фундаментальной физики.
В марте 2020 года в том же эксперименте были получены свидетельства того, что частицы нарушают один из основных принципов Стандартной модели — нашу лучшую теорию частиц и сил — предполагая возможное существование новых фундаментальных частиц и сил.
Теперь дальнейшие измерения, проведенные физиками из Кэвендишской лаборатории Кембриджа, обнаружили аналогичные эффекты, что дает основания для новой физики.
«Тот факт, что мы увидели тот же эффект, что и наши коллеги в марте, безусловно, увеличивает шансы на то, что мы действительно находимся на грани открытия чего-то нового». — Гарри Клифф
Стандартная модель описывает все известные частицы, составляющие Вселенную, и силы, через которые они взаимодействуют.На сегодняшний день он прошел все экспериментальные испытания, но, тем не менее, физики знают, что он должен быть неполным. Он не включает в себя силу гравитации и не может объяснить, как материя образовалась во время Большого взрыва, и не содержит частиц, которые могли бы объяснить загадочную темную материю, которую, по данным астрономии, в пять раз больше, чем того вещества, из которого состоит материя. видимый мир вокруг нас.
В результате физики давно ищут признаки физики, выходящие за рамки Стандартной модели, которые могут помочь нам разгадать некоторые из этих загадок.
Один из лучших способов поиска новых частиц и сил — изучение частиц, известных как кварки красоты. Это экзотические родственники верхних и нижних кварков, составляющих ядра каждого атома.
Красных кварков не существует в большом количестве в мире, поскольку они невероятно недолговечны — выживают в среднем всего одну триллионную долю секунды, прежде чем трансформируются или распадаются на другие частицы. Однако миллиарды прекрасных кварков производятся каждый год на гигантском ускорителе частиц ЦЕРНа, Большом адронном коллайдере, которые регистрируются специальным детектором под названием LHCb.
Экспериментальная пещера LHCb на LHC-IP 8. Источник: ЦЕРН
На то, как распадаются прекрасные кварки, может влиять существование неоткрытых сил или частиц. В марте группа физиков из LHCb опубликовала результаты, свидетельствующие о том, что прекрасные кварки распадались на частицы, называемые мюонами, реже, чем на их более легких собратьев, электронов. Это невозможно объяснить в Стандартной модели, которая рассматривает электроны и мюоны одинаково, за исключением того факта, что электроны примерно в 200 раз легче мюонов.В результате прекрасные кварки должны распадаться на мюоны и электроны с одинаковой скоростью. Вместо этого физики из LHCb обнаружили, что распад мюона происходит примерно на 85% чаще, чем распад электрона.
Разница между результатом LHCb и Стандартной моделью составляла примерно три единицы экспериментальной ошибки, или «3 сигмы», как это известно в физике элементарных частиц. Это означает, что вероятность того, что результат был вызван статистической случайностью, составляет примерно один шанс из тысячи.
Если результат верен, наиболее вероятное объяснение состоит в том, что новая сила, которая притягивает электроны и мюоны с разной силой, мешает распаду этих прекрасных кварков.Однако для того, чтобы убедиться в реальности эффекта, необходимо больше данных, чтобы уменьшить экспериментальную ошибку. Только когда результат достигнет порога «5 сигм», когда вероятность того, что он является случайным, составляет менее одного миллиона, физики элементарных частиц начнут считать его подлинным открытием.
«Тот факт, что мы наблюдали тот же эффект, что и наши коллеги в марте, безусловно, увеличивает шансы на то, что мы действительно стоим на пороге открытия чего-то нового», — сказал доктор Гарри Клифф из Кавендишской лаборатории.«Замечательно пролить немного света на загадку».
Сегодняшний результат исследовал два новых распада прекрасных кварков из того же семейства распадов, что использовался в мартовском результате. Команда обнаружила тот же эффект — распад мюонов происходил примерно на 70% чаще, чем распад электрона. На этот раз ошибка больше, что означает, что отклонение составляет около «2 сигм», то есть вероятность того, что это вызвано статистической ошибкой данных, составляет чуть более 2%. Хотя сам по себе результат не является окончательным, он добавляет дополнительную поддержку растущему количеству свидетельств того, что существуют новые фундаментальные силы, которые ждут своего открытия.
«Волнение вокруг Большого адронного коллайдера растет как раз в тот момент, когда скоро будет включен модернизированный детектор LHCb и будут собираться дальнейшие данные, которые предоставят необходимую статистику для утверждения или опровержения крупного открытия», — сказал профессор Вэл Гибсон, также из Кавендишская лаборатория.
Собаки действительно дальтоники? | Britannica
© Валерий Шкловский / Shutterstock.comВ кино и на телевидении всякий раз, когда показывают перспективу собаки, сцена обычно редактируется в черном, белом и сером цветах — ярко-красные розы выглядят тусклыми и темными, и свежескошенная трава кажется скорее искусственной, чем естественной.Но соответствует ли это обычное изображение собачьего взгляда реальности? Действительно ли лучший друг человека слеп ко всем цветам?
Что ж, вы можете позвонить в Голливуд и пожаловаться, потому что создатели фильма все делают неправильно. Собаки , а не видят в черно-белом, но они то, что мы бы назвали «дальтонизмом», то есть у них есть только два цветовых рецептора (называемых колбочками) в глазах, тогда как у большинства людей их три. Чтобы люди считались дальтониками, у них должен быть недостаток цветного зрения, обычно являющийся результатом дефекта образования колбочек в глазу.Цветовая слепота у людей может означать, что один из трех человеческих цветовых рецепторов не функционирует должным образом, в результате чего у некоторых остается только два рабочих конуса. Этот тип дальтонизма известен как дихроматия — альтернатива обычной человеческой трихроматии — и похож на цветовое восприятие собаки. Итак, технически собаки дальтоники (в самом человеческом смысле этого слова).
Но если собаки дальтоники, какие цвета они видят, а какие нет? Цветовые рецепторы в глазу работают, воспринимая свет только определенных длин волн.У человека каждая колбочка примерно воспринимает световые волны с длиной волны, соответствующей красному, зеленому и сине-фиолетовому цвету. Перекрывая и смешивая спектр цветов, воспринимаемых тремя человеческими колбочками, мы можем видеть самые разные цвета. У собак, однако, два цветовых рецептора в глазах воспринимают длины волн света, которые соответствуют синему и желтому, что означает, что собаки видят только в сочетании синего и желтого. Таким образом, вместо ярко-красных роз собаки, скорее всего, видят желтовато-коричневые лепестки, а живая зеленая трава выглядит более обезвоженной и мертвой.
Узнайте, действительно ли собаки дальтоничны.
Узнайте больше о цветовом зрении у собак.
Encyclopædia Britannica, Inc.Полногеномный анализ светорегулируемых генов у Aspergillus nidulans выявил сложное взаимодействие между различными фоторецепторами и новыми функциями фоторецепторов
Цитирование: Yu Z, Streng C, Seibajobi RF, Ig , Лейстер К., Ингельфингер Дж. И др. (2021) Полногеномный анализ светорегулируемых генов в Aspergillus nidulans показывает сложное взаимодействие между различными фоторецепторами и новыми функциями фоторецепторов.PLoS Genet 17 (10): e1009845. https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1009845
Редактор: Майкл Фрейтаг, Университет штата Орегон, США
Поступило: 17 апреля 2021 г .; Одобрена: 28 сентября 2021 г .; Опубликован: 22 октября 2021 г.
Авторские права: © 2021 Fischer et al. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.
Доступность данных: Данные, лежащие в основе результатов, представленных в исследовании, доступны в (NCBI). Исходные данные RNAseq доступны в базе данных NCBI (идентификатор биопроекта: PRJNA706475): https://www.ncbi.nlm.nih.gov/bioproject/PRJNA706475.
Финансирование: рф. получил грант (DFG Fi 459 / 19-1) от Немецкого научного фонда (Deutsche Forschungsgemeinschaft, https://www.dfg.de). Спонсор не имел никакого отношения к дизайну исследования, сбору и анализу данных, принятию решения о публикации или подготовке рукописи.
Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.
Введение
Свет является обычным фактором окружающей среды, стимулирует фотосинтез, может вызывать повреждение клеток и может использоваться для ориентации и адаптации. Таким образом, светочувствительность очень распространена у растений и животных, но не очень очевидна для микроорганизмов. Однако мицелиальные грибы, а также Saccharomyces cerevisiae способны реагировать на свет. В S . cerevisiae свет опосредованно воспринимается через концентрацию активных форм кислорода (АФК), которая может увеличиваться, когда синий свет поглощается молекулами флавина [1]. Это основной механизм, вероятно, сохраняющийся у многих организмов. Для сравнения, световые ответы у мицелиальных грибов могут быть гораздо более сложными и специфическими, включая один или несколько фоторецепторных белков [2–6]. В процессе эволюции возникло всего несколько таких хромопротеидов. В то время как млекопитающие в основном используют родопсины для восприятия света и цвета, многие грибы используют разные фоторецепторы для синего, зеленого, красного и дальнего красного света [7].Более того, есть много примеров того, как фоторецепторы размножались в ходе эволюции грибов. Яркими примерами с большим количеством предполагаемых фоторецепторных белков являются Phycomyces blakesleanus , Mucor circinelloides , Botrytis cinerea или Knufia petricola [3,8–12]. Это делает грибы особенно привлекательными для изучения роли отдельных фоторецепторов, а также их функционального взаимодействия и, возможно, их эволюции.
На молекулярном уровне реакции синего света лучше всего изучены у Neurospora crassa , где они связаны с циркадными часами [13–15].Хотя это явление было описано несколько десятилетий назад, и были выделены мутанты, реагирующие на синий свет (белые воротнички 1, 2), фоторецептор (WC-1) был открыт только в 2002 году. Интересно, что это был регулятор транскрипции со связанной молекулой флавина [16,17]. Следовательно, сложный каскад передачи сигнала не требуется для передачи светового сигнала на дифференциальную экспрессию гена. Тем не менее, у некоторых грибов ответ на синий свет взаимосвязан с другими сигнальными каскадами [18]. N . Анализ экспрессии crassa по всему геному показал, что большая часть (до 30%) генома находится под контролем света [19–21]. В Trichoderma atroviride было получено аналогичное количество дифференциально регулируемых генов [22]. Помимо доминирующего отклика на синий свет, N . crassa также может реагировать на красный свет с помощью фитохрома и на зеленый свет с помощью опсинов, хотя их вклад на уровне всего генома довольно незначителен [23-25].
Совершенно иной световой ответ, по-видимому, реализуется в Aspergillus nidulans , который демонстрирует ярко выраженный ответ на красный свет с фитохромом, который является основным фоторецепторным белком [26,27]. Реакция на красный свет лучше всего изучена в A . nidulans , где фитохром является фоторецептором, а сигнал передается из цитоплазмы с использованием пути киназы HOG MAP в ядра. Кроме того, часть фитохрома действует в ядрах на ферменты ремоделирования хроматина [4,28–31].Еще один важный регулятор светового отклика в A . nidulans — это белок Velvet, VeA [32–34]. Вероятно, он является активатором транскрипции и функционально и физически взаимодействует с фитохромом [27,35]. Помимо фитохрома, А . nidulans содержит ортологи N . crassa белые воротнички, хотя они, по-видимому, обладают репрессирующими функциями [27]. Другой пример грибка с ярко выраженным фотоответом на красный свет — Alternaria alternata [36].Недавно были идентифицированы две гемооксигеназы, которые участвуют в биосинтезе фитохромных хромофоров и определили новую роль митохондрий грибов [37]. В дополнение к фоторецепторам красного и синего света, A . alternata содержит два предполагаемых опсина в виде протонных насосов, стимулированных зеленым светом.
Многие выводы о механизме фитохром-зависимого светочувствительности в A . nidulans основаны на анализе экспрессии двух индуцированных светом генов, ccgA и conJ [4].Можно ли распространить эти результаты на все гены, вызываемые красным светом, или все гены, индуцированные светом, оставалось открытым вопросом. Предыдущие полногеномные анализы экспрессии с использованием подходов микрочипов показали, что большая часть генома находится под контролем света, но оставалось неясным, контролируют ли разные фоторецепторы разные классы генов [19,22,38]. Было также показано, что красный свет стимулирует конидиацию, и этот эффект можно обратить вспять с помощью освещения дальним красным светом [39]. С другой стороны, дальний красный свет ингибировал прорастание сильнее, чем красный свет, а для ответа требовался фитохром [40].Было также доказано, что фитохром необходим для зависимого от синего света фосфорилирования киназы HOG MAP SakA [31]. Здесь мы показываем, что в A . nidulans более 1100 генов (примерно 10% генома) по-разному экспрессируются через 15 минут освещения, и что существуют обычно регулируемые гены, а также определенные классы генов, контролируемых красным, дальним красным и синим светом. Кроме того, мы показываем новые функции фитохрома в дальнем красном свете и в восприятии синего света.
Материалы и методы
Штаммы, плазмиды и условия культивирования
Минимальная средняя (мм) для A . nidulans получали, как описано [41]. А . nidulans. штаммов, использованных в этом исследовании, перечислены в таблице 1 .
Е . coli BL21 (DE3) использовали для гетерологичной экспрессии рекомбинантного A . нидуланы FphA. Ан E . coli K12 оптимизированная по кодонам синтетическая версия A . nidulans fphA клонировали в вектор pASK-IBA3 (IBA, Goettingen) [42]. BphO_pACYCDuet использовали для получения биливердина.
Световые короба
Панель (печатная плата) имеет размеры 39 см в ширину и 28 см в длину. На панели 12 монохроматических светодиодов с длиной волны 450 нм (синий, SMBB450H-1100, Ushio), 525 нм (зеленый, SMBB525V-1100 rev. B, Ushio), 700 нм (красный, SMBB700-1100, Ushio) и 760 нм. нм (дальний красный, SMBB760-1100, Ushio) с допуском +/- 10 нм и 12 белых светодиодов 5600 K (Q65112-A1637, Osram) были спаяны в 12 кластеров, состоящих из одного светодиода каждого типа с учетом идеи для освещения до 12 чашек Петри Ø 92 мм.Для модуля Photon P1 WIFI было написано самодельное программное обеспечение, чтобы учитывать интенсивность каждого типа света и определенные моменты времени. Для калибровки программного обеспечения использовался спектрометр с оптикой океана JAZA0503. Для каждого типа светодиода поток фотонов измерялся на расстоянии 20 см. Поток фотонов в следующих экспериментах относился к этой калибровке. Для безопасной работы максимальный поток фотонов был ограничен до 17 мкмоль фотонов м -2 с -1 . Однородное освещение обеспечивалось углом обзора 130 ° для монохроматических и 120 ° для белых светодиодов и помещением образца по центру под кластер светодиодов.
лайтбоксов были откалиброваны путем измерения абсолютной интенсивности с использованием портативного JAZ-COMBO S / N: JAZA0503 со спектрометром QP400-1-VIS-NIR и CC-3-UV-S (Ocean Optics). Измерения оценивали с использованием дополнительного программного обеспечения SpectraSuite и интегрирования площади под кривой для определения абсолютной интенсивности в мкмоль фотонов на квадратный метр и секунду (мкмоль фотонов м -2 с -1 ). Необходимая мощность светодиода для достижения желаемой интенсивности определялась индивидуально для каждого типа светодиода.
Репортерный анализ на основе люциферазы
Чтобы облегчить количественную оценку и сравнение световых ответов, мы разработали репортерный анализ на основе люциферазы. С этой целью интересующий промотор ( ccgA , conJ ) клонировали перед геном люциферазы в плазмиде, содержащей мутантный аллель argB . Плазмиду использовали для трансформации мутанта argB2 , в котором делеция одного цитозинового нуклеотида в положении 248 от стартового кодона приводит к стоп-кодону в кодоне 115.Интеграция кольцевой argB , содержащей плазмиду , в локус после мутации argB2 , восстанавливает функциональную argB -открытую рамку считывания. Затем репортерную конструкцию вводили в мутанты фоторецепторов путем скрещивания. Эта стратегия интеграции в локус гарантирует сопоставимость результатов между разными штаммами.
Репортерные плазмиды люциферазы (pJR18 conJ (p) :: lucI :: argB , pJR19 ccgA (p) :: lucI :: argB ) с конусом conJ или Промотор ccgA (1 т.п.н.) был сконструирован с использованием следующих олигонуклеотидов: Luc-BamHI-for CGC AGG ATC CAT GGA GGA CGC CAA GAA CAT C; Luc-EcoRI-rev GCC GGA ATT CAG AGC TTG GAC TTG CCG CC; pccgA-XhoI CTT CTA CCT CGA GCC TCA AAC AAT TCG ACG; pccgA-BamHI GCG CTG GGA TCC TGC GAT TGT TTA TAT G; pconJ-XhoI CTT CTA CCT CGA GAT GGT CTT ACA GTC GAC; pconJ-BamHI GCG CTG GGA TCC TTG ATG TAT TTA AAG AAT TG.
Для репортерного анализа на основе люциферазы каждую лунку 96-луночного планшета заполняли 170 мкл ММ с добавлением 1 мкМ D-люциферина (Perkin Elmer). Планшет инкубировали при 37 ° C в течение 16 ч в темноте. После периода инкубации образцы измеряли с помощью планшет-ридера (Perkin Elmer Enspire Multimode) каждые 10 минут повторно в течение 90 минут. Планшет освещался за пределами планшет-ридера под панелью. Как только началось измерение, пластина втягивалась в машину, и передняя заслонка закрывалась.Следовательно, измерения люциферазы проводились в темноте, но как только измерение было выполнено, пластина снова освещалась. Для подсветки синим светом мы использовали такие же светодиодные панели, как описано выше.
Анализ концентраций реактивного кислорода (АФК)
Моделирование настроек лайтбокса для измерений ROS было выполнено с использованием комбинации галогенной лампы Zeiss Axiomanager Z1 (Carl Zeiss, Jena) и синих оптических фильтров SCHOTT GLAS (тип: BG28, толщина 2 мм).Параметры напряжения были определены с помощью той же портативной спектрометрической системы JAZ-COMBO, которая использовалась для калибровки лайтбокса. Фокус был установлен при использовании зеленого фильтра, чтобы предотвратить активацию A . нидуланов световых отзывов. Измерения ROS проводили с использованием реагента CellROX Orange (Invitrogen, Thermo Fisher Scientific). Прекультуры соответствующих штаммов выращивали в темноте на покровных стеклах в течение ночи при комнатной температуре. После этого клетки инкубировали с 2 мкмоль реагента CellROX Orange в минимальной среде (с соответствующими добавками) в темноте в течение 25 мин.Затем клетки дважды промывали PBS по 5 мин. Затем покровные стекла промывали один раз минимальной средой и помещали на предметные стекла микроскопа, покрытые тонким слоем твердой среды (1% агарозы). Иногда, когда во время подготовки требовалась некоторая видимость, использовался зеленый свет (около 520 нм), чтобы предотвратить активацию A . nidulans световые реакции и преждевременная индукция активных форм кислорода. Замедленная съемка записывалась в течение 30 минут с одним снимком каждые 20 секунд.Сигналы ROS были количественно определены с помощью ImageJ. Значения были нормализованы к значению шкалы серого исходного изображения в каждом интервале времени. Поскольку небольшое увеличение фоновой флуоресценции было обнаружено в некоторых промежутках времени, фоновый сигнал также регистрировался и вычитался.
Экстракция РНК и количественная ПЦР с обратной транскриптазой (RT-qPCR)
Конидии разных штаммов высевали на поверхность жидкой минимальной среды (2% глюкозы) с добавлением 1 мкг / мл пиридоксина HCl, 1 мг / мл урацила, 1 мг / мл уридина и 1 мкг / мл п-аминобензойной кислоты и культивируют в темноте 18 часов при 37 ° C.После этого красный, синий и дальний красный свет были выставлены отдельно на 15 мин. Двойная обработка двумя разными световыми качествами проводилась путем освещения в течение 15 минут первой длиной волны с последующим 15-минутным освещением второй. Мицелий собирали и замораживали в жидком азоте. Для анализа экспрессии гена в ответ на окислительный стресс штаммы культивировали в жидкой среде (2% глюкозы плюс добавки) во встряхиваемых колбах при 37 ° C в течение 24 часов, а затем вводили 30 мМ перекиси водорода на 15 или 30 минут.РНК экстрагировали (Mini Kit E.Z.N.A. Fungal RNA, Omega Bio-Tek) и расщепляли ДНК (TURBO DNase, Invitrogen). Экспрессию светорегулируемых генов ccgA и ccgB измеряли с помощью количественной ПЦР с обратной транскриптазой (RT-qPCR) (SensiFAST SYBR No-ROX One-Step Kit, bioline) с геном h3b в качестве контроля. Использованные праймеры: h3b-RT-F (5′-CTG CCG AGA AGA AGC CTA GCA C-3 ‘), h3b-RT-R (5′-GAA GAG TAG GTC TCC TTC CTG GTC-3′), ccgA- RT-F (5’-CGA CGC TTC CCT CAC TTC TC-3 ‘), ccgA-RT-R (5′-CAT CAT GGG ACT TCT CGT CCT T-3′), ccgB-RT-F (5’- GGA GACT ATC AAG GTA AGC ATG TAC C-3 ‘), ccgB-RT-R (5′-CTT GTC AAA GAG AGC GTC CTT G-3’).
Секвенирование РНК
Свежие конидии дикого типа и мутанты (40 мкл суспензии конидий с 1 × 10 8 конидий / мл) высевали на поверхность 3 мл дополненной жидкой минимальной среды (2% глюкозы плюс соответствующие добавки) в чашках Петри (3 см диаметр, всего 52 чашки Петри) и культивировали в темноте в течение 18 часов при 37 ° C. После этого образцы подвергали воздействию красного, синего и дальнего красного света по отдельности или выдерживали в темноте (темный контроль) в течение 15 мин. Мицелии собирали при тусклом зеленом свете сразу после воздействия света и замораживали в жидком азоте.Для каждого условия мы приготовили четыре биологических повтора (в следующем эксперименте три из них лучшего качества были выбраны для секвенирования РНК). Разрушение клеток выполняли с помощью клеточного гомогенизатора (MM200, Retsch) со скоростью 30 ударов / мин в течение 5 минут, и РНК экстрагировали с помощью мини-набора для растений RNeasy (Qiagen). Образцы РНК обрабатывали набором без ДНК TURBO (AM1907, Invitrogen, Thermo Fisher Scientific). Качество образцов РНК анализировали с помощью анализатора Agilent 2100 Bio (Agilent RNA 6000 Nano Kit).Число целостности РНК (RIN) каждого образца было выше 9,5, а соотношение 28S / 18S рРНК образцов было между 2,4 и 3,6. Отношение A260 / A280 было больше 2,0, а A260 / A230 было больше 1,8.
Для создания библиотеки мРНК трех биологических повторов каждого состояния обогащали селекцией олиго dT. Библиотека была создана BGI GENOMICS Co., Ltd. с использованием реагентов in house . Образцы РНК фрагментировали и подвергали обратной транскрипции в двухцепочечную кДНК с использованием случайных праймеров N6.Синтезированная кДНК была подвергнута репарации на концах, а затем 3 ’аденилирована и дополнительно лигирована с адаптерами. ПЦР-амплификацию проводили для обогащения матриц кДНК. Продукт ПЦР денатурировали нагреванием, а затем однонитевую ДНК подвергали циклизации с помощью олигонуклеотида сплинта и ДНК-лигазы. Образцы секвенировали на платформе BGISEQ-500 в BGI (BGI GENOMICS Co., Ltd.).
Чистые чтения были отфильтрованы с использованием внутреннего программного обеспечения BGI SOAPnuke (версия: v1.5.2, https://github.com/BGI-flexlab/SOAPnuke) из низкокачественных чтений, чтений с адаптерами и чтений с неизвестными базами и были сохранены в формате FASTQ [43].Чистые чтения были сопоставлены с эталонным геномом (http://www.aspgd.org) с помощью Bowtie2 (версия: v2.2.5, http://www.ccb.jhu.edu/software/hisat) [44]. Уровни экспрессии генов рассчитывали с помощью RSEM (версия: v1.2.12, http://deweylab.biostat.wisc.edu/RSEM) [45]. Дифференциально экспрессируемые гены (DEG) (кратное изменение ≥ 2, скорректированное значение p ≤ 0,05) были идентифицированы с помощью алгоритма DEseq2 [46]. ДЭГ классифицировали согласно официальной классификации (KEGG). С результатами аннотации GO и KEGG, функциональные обогащения GO и пути KEGG были выполнены с помощью инструментов OmicShare (https: // www.omicshare.com/tools/). Тепловые карты были созданы в среде R.
Спектральный анализ фитохрома
Гетерологичная экспрессия FphA из A . nidulans осуществляли с использованием системы экспрессии, управляемой промотором tet , под контролем индуцируемого ангидротетрациклином (AHT) промотора (IBA, Goettingen). Экспрессированный белок содержит С-концевую Strep-метку . E . Клетки coli BL21 (DE3) котрансформировали плазмидой, кодирующей гемоксигеназу BphO из Pseudomonas aeruginosa , и плазмидой, кодирующей FphA.Holo FphA экспрессировали и очищали в тусклом зеленом свете, как описано ранее [26,42].
Спектры записаны на спектрофотометре JASCO V-750. Все эксперименты проводились при зеленом безопасном освещении. Облучение образцов проводили вручную с использованием специально изготовленного лайтбокса с соответствующими устройствами для облучения синим светом (450 нм, 6,8 мкмоль м -2 с -1 , облучение 30 мин), красным светом (700 нм, 3,4 мкмоль м -2 с -1 , облучение 2 мин) и дальнего красного света (760 нм, 3.4 мкмоль м -2 с -1 , облучение 4 мин).
Результаты
Реактивные формы кислорода (АФК), опосредованные фоторецепторами, световые ответы
Свет может мешать различным клеточным процессам за счет генерации активных форм кислорода (АФК), которые, в свою очередь, могут вызывать резкие изменения в экспрессии генов [1]. Поскольку нас интересовали специфические, зависящие от фоторецепторов световые реакции, мы сначала протестировали экспрессию двух ранее известных светоиндуцированных генов, ccgA и conJ , чтобы оптимизировать условия освещения и уменьшить любые побочные эффекты ROS до глобального воздействия. экспрессионный анализ [28].С этой целью были разработаны светодиодные панели, которые позволяли легко изменять интенсивность света или использовать определенные длины волн. Измерение спектра излучаемого света светодиодов подтвердило пики при 450 нм для синего света, 700 нм для красного света и 760 нм для дальнего красного света (S1A фиг.) . Мы также разработали репортерную систему на основе люциферазы для отслеживания индуцированной светом индукции генов. Люциферазная конструкция была интегрирована в локус argB во всех штаммах, чтобы гарантировать сопоставимость результатов.Штаммы инкубировали в 96-луночном планшете (установленном в планшет-ридере), заполненном минимальной средой (MM), содержащей 1 мкМ люциферина, в течение 16 ч при 37 ° C в темноте. Люминесценция была низкой и оставалась ниже 10.000 при хранении в темноте. Во время освещения с двумя разными интенсивностями (1,7 и 17 мкмоль фотонов м -2 с -1 ) образцы измеряли повторно каждые 10 мин в течение 90 мин (рис. 1A и 1B) . Различная фоновая люминесценция в разных образцах перед освещением, вероятно, связана с разными штаммами, поскольку для инокуляции использовалось одинаковое количество конидий.Как описано ранее, оба гена хорошо реагировали на красный свет, и для световой индукции необходим фитохром [28]. Фотоадаптация, как это наблюдается при отслеживании уровней РНК (S1B Фиг.) , не наблюдалась, вероятно, потому, что люцифераза является довольно стабильным ферментом. Ответ на красный свет conJ требовал FphA, а также рецептора синего света LreA, тогда как ccgA также индуцировался в отсутствие LreA. (Рис. 1A и 1B) . Оба гена также индуцировались дальним красным и синим светом, хотя и в гораздо меньшей степени.Индукция дальнего красного и синего света conJ требовала FphA и LreA. В ответ ccgA LreA, по-видимому, обладает репрессирующей функцией. Это было наиболее очевидно в синем свете более высокой интенсивности (S2 Фиг.) .
Рис. 1. Репортерный анализ на основе люциферазы.
(A) Люциферазу клонировали за промотором conJ и трансформировали в штаммы дикого типа, штаммы с делецией ΔfphA- или ΔlreA-. После 16 ч инкубации в темноте люминесценцию измеряли каждые 10 мин в течение 90 мин при указанных условиях освещения. (B) Измерение выполняли так же, как и в случае (A) , но люцифераза находилась под контролем промотора ccgA . Графики представляют собой среднее значение трех биологических повторов с двумя или тремя техническими повторами. Планки погрешностей указывают на стандартное отклонение.
https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1009845.g001
В совокупности мы предоставляем первое свидетельство того, что FphA играет роль в восприятии синего света и что, как показано ранее [28], LreA может быть активатором но и репрессор.Кроме того, красный, дальний красный и синий свет могут стимулировать экспрессию генов, но разные гены реагируют по-разному. Мы наблюдали, что стимулированная синим светом ccgA экспрессия не зависела от LreA при низких интенсивностях.
Затем мы проверили, были ли световые реакции специфичными для света или могли ли они быть вызваны косвенно через активные формы кислорода (АФК). Мы выбрали ccgA и ccgB , два гена, которые хорошо реагируют на синий свет, для этого анализа, потому что индукция синего света conJ была не очень выраженной, а погрешности всегда были довольно большими.Оба гена, ccgA и ccgB действительно индуцировались не только светом, но и после инкубации мицелия в присутствии 30 мМ H 2 O 2 в течение 15 или 30 минут (Рис. 2A) . Также были доказательства в A . fumigatus и A . alternata , что мутанты фитохромов более устойчивы к окислительному стрессу [37,47]. Поэтому мы протестировали рост WT и различных мутантных штаммов на минимальной среде, содержащей менадион (100 мкМ).В самом деле, все мутанты по фоторецепторам давали более крупные колонии, чем дикого типа (фиг. 2B) . Затем концентрацию внутриклеточных ROS контролировали под микроскопом с использованием реагента CellROX Orange (Invitrogen; Thermo Fischer Scientific). Диффузионный реагент на мембране поглощает свет с длиной волны 545 нм и излучает свет с длиной волны 565 нм после окисления. При освещении синим светом с интенсивностью 1,7 мкмоль фотонов m -2 с -1 флуоресценция была очень слабой. Когда интенсивность была увеличена до 17 мкмоль фотонов m -2 с -1 , интенсивность флуоресценции увеличилась во всех гифах, что указывает на генерацию ROS в ответ на интенсивный синий свет (Рис. 2C и 2D и S1 Movie) .Волны других длин (зеленый — около 530 нм; красный — около 680 нм; дальний красный — около 720 нм) не приводили к усилению внутриклеточного сигнала АФК ни при низкой, ни при высокой интенсивности. Затем мы проанализировали вклад FphA, LreA и стресс-активируемой киназы MAP, SakA в ответ на синий свет высокой интенсивности. У всех штаммов концентрация АФК увеличивалась одинаково примерно в течение ок. 15 мин. В то время как концентрация АФК у дикого типа и штамма с ΔsakA -делецией дополнительно увеличивалась на прибл.Через 5 мин концентрация оставалась на плато в штамме-делеции ΔlreA . В штамме с делецией ΔfphA концентрация также достигла плато, но несколько ниже, чем в мутанте ΔlreA . По-видимому, штамм с делецией ΔfphA более устойчив к окислительному стрессу.
Рис. 2. Уровни активных форм кислорода (АФК) у штаммов дикого типа (SJR2) и ΔfphA- , ΔlreA- , ΔsakA- и ΔfphA / ΔlreA -делительных штаммов.
(A) Анализ экспрессии ccgA и ccgB в условиях окислительного стресса. Мицелий, выращенный в жидкой минимальной среде с добавками во встряхиваемых колбах в темноте, собирали после введения 30 мМ перекиси водорода в течение 15 и 30 минут. Экспрессия ccgA и conJ была нормализована к гену h3b . Планка погрешности была рассчитана для трех биологических повторов. Значимые различия были рассчитаны с использованием двухвыборочного теста t (** P <0.01 и *** P <0,001). (B) Рост указанных штаммов на минимальной среде (контроль) и минимальной среде, содержащей 100 мкМ менадиона, при 37 ° C. Для каждого штамма было инокулировано 5000 спор, и изображения были сделаны через 48 часов (контроль) и 120 часов (минимальная среда + 100 мкМ менадион. (C) Репрезентативные изображения сигналов ROS, количественно оцененные в (D) . WT и ΔfphA -деформации были выбраны в качестве примеров.Масштаб = 10 мкм. (D) Количественная оценка сигналов ROS после освещения синим светом на 1.7 мкмоль фотонов m -2 с -1 (слева) и при 17 мкмоль фотонов m -2 с -1 (справа). Относительное увеличение сигналов ROS по сравнению с исходным значением (нормализовано к 1). Планки погрешностей указывают на стандартное отклонение.
https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1009845.g002
В совокупности результаты все еще показывают, что генерация АФК происходила при 17 мкмоль фотонов м -2 с -1 , что индуцировало ccgA в некоторой степени, но с 1.7 мкмоль фотонов m -2 с -1 Генерация АФК была очень низкой, и экспрессия ccgA не стимулировалась. Исходя из этого, мы предполагаем, что условия низкой интенсивности света не должны вносить значительный вклад в активацию генов.
Чтобы выяснить актуальность этих результатов в отношении контроля экспрессии всего генома, мы выполнили анализ RNAseq в условиях низкой интенсивности света. Поскольку фитохромные хабы входят в путь киназы SakA MAP, мы ожидали сильного эффекта освещения на связанные со стрессом гены и включили штамм с делецией ΔsakA -MAP-киназы в эксперименты по профилированию экспрессии.
Различные длины волн контролируют общие, но также и специфические наборы генов
дикого типа (SJR2) освещали 1,7 мкмоль фотонами m -2 с -1 в течение 15 минут после 18 часов культивирования в темноте на поверхности минимальной среды с добавками. Мы выбрали 15 минут освещения, потому что более длительное освещение вызвало снижение уровней экспрессии ccgA и conJ из-за процессов адаптации (S1B Рис) . Кроме того, относительно короткое время экспозиции должно устранить вторичные эффекты после управления светом ключевых регуляторов для e.грамм. развитие или вторичный обмен веществ. Температура в инкубационных камерах регистрировалась и не повышалась из-за освещения. В N . crassa было показано, что белки белых воротничков рекрутируются на промотор, контролируемый синим светом, через 15 мин [19]. В А . nidulans LreA связывается с промотором ccgA в темноте и высвобождается через 15 мин после освещения синим светом [28].
Перед экспериментом RNAseq мы проверили выделенную РНК, проверив экспрессию двух индуцированных светом генов, которые были лучшими кандидатами из предыдущего анализа экспрессии [38].Оба были вызваны красным, дальним красным и синим светом (рис. 3A) . Всего 1134 гена дифференциально экспрессировались (DEG) (кратное изменение ≥ 2, скорректированное значение p ≤ 0,05) после воздействия красного, дальнего красного или синего света по сравнению с инкубацией в темноте (таблица S1) . 895 генов были активны, а 239 генов подавлены. Наибольшее изменение уровня экспрессии наблюдалось в условиях красного света, когда 785 генов были активированы, а 220 — подавлены. В дальнем красном свете 393 гена были активированы, а 57 гены подавлены.Синий свет имел наименьшее влияние на 291 гены с повышенной и 102 подавляющей регуляции (рис. 3B) . Среди активированных генов 231 ген был активирован для всех трех длин волн, тогда как 446 генов были для красного света, 100 генов были для далекого красного света и только 6 генов были специфичными для синего света. Примечательно, что 97% (281 из 291) генов, индуцируемых синим светом, также индуцировались красным светом, а 81% (235 из 291) также индуцировались дальним красным светом. Среди генов, подавленных светом, 220, 57 и 102 гена подавлялись красным, дальним красным и синим светом соответственно.108 генов были специфичными для красного света, 14 генов — для дальнего красного света и пять генов были специфичными для синего света. 95% генов, подавленных синим светом, также подавлялись красным светом.
Рис. 3. Транскрипционная реакция штамма дикого типа на воздействие красного, синего и дальнего красного света.
(A) Экспрессия ccgA и ccgB у дикого типа в красном, синем и дальнем красном свете количественно определена с помощью количественной ПЦР с обратной транскриптазой (RT-qPCR). Красный, синий и дальний красный свет с интенсивностью 1.7 мкмоль фотонов m -2 s -1 применяли в течение 15 мин перед выделением РНК. Экспрессия ccgA и conJ была нормализована к гену h3b . Планка погрешности была рассчитана для трех биологических повторов. (B) Анализ диаграммы Венна дифференциально экспрессируемых генов (DEG) (кратное изменение ≥ 2, скорректированное значение p ≤ 0,05), идентифицированных в красном, дальнем красном и синем свете. (C) Анализ обогащения ДЭГ ГО. (D) Анализ пути KEGG, выполненный со всеми DEG, идентифицированными в красном, дальнем красном и синем свете (значение p <0.05). Цвет пузырьков указывает значение -log 10 (значение q), а значение q представляет собой скорректированное значение p. Фактор богатства относится к частному количества ДЭГ и общего количества генов в пути. (E) Список DEG, участвующих в биогенезе рибосом. На тепловой карте отображаются значения журнала 2 (кратное изменение) DEG. Цветовая шкала, -1,5 ≤log 2 (кратное изменение) ≤0,5.
https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1009845.g003
Затем DEG были проанализированы на предмет их функций с использованием Gene Ontology (GO) (рис. 3C и таблица S2) .«Верхний» обогащенный GO-термин генов, активированных в красном, дальнем красном и синем свете, — это каталитическая активность , за которой следует метаболический процесс и мембрана . Среди генов с пониженной регуляцией, наиболее значительно обогатились GO-термины клетки и клеточной части , за которыми следует метаболический процесс . Далее был проведен анализ пути KEGG со всеми DEG, и «Топ 17» обогащенных путей (значение p <0,05) перечислены (фиг. 3D и таблица S3) .Интересно, что биогенез рибосом был первой категорией, и все 24 гена биогенеза рибосом были репрессированы красным, дальним красным и синим светом (рис. 3E и S3) . Эти результаты показывают массовые изменения обилия транскриптов метаболических генов, и подавление биогенеза рибосом может указывать на задержку трансляции и, следовательно, задержку изменений метаболизма. Аналогично в N . crassa light подавляла метаболизм рРНК [21].
Фитохром является доминирующим фоторецептором для реакции на красный и синий свет
После анализа DEG мы заинтересовались механизмами, объясняющими наблюдаемые изменения транскрипции после 15 мин освещения, и сравнили изменения транскрипции у дикого типа (SJR2), a ΔfphA- (SJR10), a ΔlreA — ( SSR66) и штамм с делецией ΔsakA (SZY31).Все штаммы содержали аллель дикого типа гена velvet ( veA + ). Чтобы связать новые данные с использованием новой системы освещения с ранее полученными данными, мы сначала проанализировали экспрессию двух регулируемых светом генов ccgA и ccgB . В штамме с делецией ΔfphA ccgA и ccgB не реагировали на свет, но в штамме с делецией ΔlreA эти два гена хорошо индуцировались в красном и в некоторой степени даже в синем свете.В штамме с делецией ΔsakA экспрессия ccgA и ccgB подавлялась в темноте по сравнению с диким типом, и оба гена больше не индуцировались светом (фиг. 4A) . Эти результаты могут быть объяснены современной моделью, согласно которой фитохром передает сигналы через путь HOG и что LreA может иметь репрессивную функцию [4,28,31]. Затем мы изучили роль FphA, LreA и SakA в регуляции всех генов, регулируемых светом. Таким образом, был проведен иерархический кластерный анализ всех DEG, идентифицированных у дикого типа, штамма с делецией ΔfphA-, ΔlreA- и ΔsakA -деление штамма при воздействии красного и синего света.На тепловой карте иерархической кластеризации DEG дикого типа в красном свете и штамма с делецией ΔlreA- как в красном, так и в синем свете были сгруппированы в группу I, а остальные попали в группу II (S4 фиг.) .
Рис. 4. Транскрипционный ответ дикого типа, ΔfphA -, ΔlreA — и ΔsakA -деление штаммов при воздействии красного, синего и дальнего красного света.
(A) Экспрессия ccgA и ccgB в различных штаммах в красном, синем и дальнем красном свете, измеренная с помощью количественной ПЦР с обратной транскриптазой (RT-qPCR).Эксперимент проводили, как указано выше. Планка погрешности была рассчитана для трех биологических повторов. (B) Анализ диаграммы Венна ДЭГ, идентифицированных в различных штаммах при освещении красным светом. (C) Диаграмма Венна анализ ДЭГ, идентифицированных в различных штаммах при воздействии синего света. (D) Тепловая карта DEGs, участвующих в биогенезе рибосом у указанных штаммов. Цвета тепловой карты представляют журнал 2 (кратное изменение) DEG. Цветовая шкала, -1.6≤log 2 (кратное изменение) ≤0,2. (E) Тепловая карта ДЭГ, участвующих в ассимиляции азота у указанных штаммов. На тепловой карте отображается журнал 2 (кратное изменение) DEG. Цветовая шкала, -0,3 ≤log 2 (кратное изменение) ≤2,7. (F) Тепловая карта DEG, участвующих в двухкомпонентных системах регулирования. На тепловой карте отображается журнал 2 (кратное изменение) DEG. Цветовая шкала, 0 ≤log 2 (кратное изменение) ≤3,9.
https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1009845.g004
Пять профилей экспрессии штамма с делецией ΔlreA в синем свете, штамма с делецией ΔfphA и штамма с делецией ΔsakA в синем и красном свете, соответственно, были сгруппированы в группу II ( S4 Рис) . Штамм с делецией ΔfphA и штамм с делецией ΔsakA в синем и красном свете соответственно были сгруппированы в подгруппу группы II, где по-разному экспрессировалось меньше генов. 96% (757 из 785) индуцируемых красным светом генов, обнаруженных у дикого типа, больше не индуцировались красным светом в отсутствие фитохрома (рис. 4B) .Однако все еще оставалось 100 генов, индуцированных в штамме с делецией ΔfphA красным светом, 72 из которых не индуцировались у дикого типа. Экспрессия одного из таких генов была подтверждена количественной ПЦР в реальном времени (S5A фиг.) .
В синем свете 350 генов были индуцированы в штамме с делецией ΔfphA , но только 42 из этих генов были индуцированы синим светом у дикого типа (рис. 4C) . Интересно, что при удалении fphA индуцировался набор индуцируемых светом генов, которые не индуцировались у дикого типа красным (72 гена) или синим светом (308 генов).86% (249 из 291) индуцируемых синим светом генов, обнаруженных у дикого типа, не индуцировались в отсутствие FphA. Пример гена, который все еще индуцировался в синем свете без FphA, был подтвержден с помощью RT-qPCR (S5B фиг.) .
В кластере 2 большинство генов, которые были репрессированы красным и синим светом, больше не могли репрессироваться в штамме с делецией ΔfphA (S4 Fig) . У дикого типа 220 генов подавлялись красным светом, но 218 из них (99%) больше не могли репрессироваться без FphA (рис. 4B) .Аналогичным образом, 101 ген из 102 (99%) репрессированных синим светом у дикого типа не был обнаружен в штамме с делецией ΔfphA (рис. 4C) . Следовательно, фитохром играет ключевую роль в светозависимой репрессии генов.
LreA подавляет световые реакции в синем и красном свете
К нашему удивлению, штамм с делецией ΔlreA оказался более чувствительным как к красному, так и к синему свету. Большинство усиленных генов в группе I имели более высокий уровень экспрессии в штамме ΔlreA -делеции в красном свете.В штамме с делецией ΔlreA было идентифицировано больше DEG по сравнению с диким типом в красном и синем свете соответственно. В штамме с делецией ΔlreA- было повышено количество 902 гена по сравнению с 785 генами дикого типа в красном свете, и, кроме того, большинство генов с повышенной экспрессией в штамме дикого типа имеют более высокие уровни экспрессии в штамме с делецией ΔlreA- ( Фиг.4B, 4C и S4) . 17% (137 из 785) генов с усиленной регуляцией у дикого типа в красном свете больше не могут быть активированы (Рис. 4B) .Однако ряд генов, индуцируемых красным светом (137 генов), обнаруженных у дикого типа, не индуцировался, если LreA отсутствовал. С другой стороны, 254 гена, которые не индуцировались красным светом у дикого типа, были индуцированы в этом штамме.
В синем свете, 291 ген был активирован у дикого типа, но, что удивительно, 723 гена были активированы в штамме -делеции ΔlreA (рис. 4C) . Только 17% (49 генов из 291), которые были активированы у дикого типа в синем свете, не могли быть активированы без LreA.Вместо этого, по сравнению с диким типом, 481 ген, на которые приходилось 67% (481 из 723) индуцируемых синим светом генов в делеционном красителе ΔlreA , были дополнительно активированы. Эти результаты демонстрируют, что LreA играет сильную репрессивную роль в экспрессии генов, особенно в синем свете.
Путь MAP-киназы SakA является основным модулем для восприятия красного и синего света
В красном свете только 13 генов были активированы в штамме ΔsakA -делеции по сравнению с 769 генами дикого типа.Только 1 ген был репрессирован красным светом по сравнению с 220 у дикого типа (рис. 4B) . 100 генов с повышенной и 15 генов с пониженной регуляцией в штамме с делецией ΔfphA не реагировали на красный свет в штамме с делецией ΔsakA .
В синем свете 290 генов были индуцированы у дикого типа, 97% из которых не были индуцированы без SakA. 115 из активированных генов кодируют ферменты, 60 из которых являются оксидоредуктазами. Однако в штамме ΔsakA -делеции в синем свете произошла активация 210 генов.Репрессия всех 102 генов, подавленных синим светом, у дикого типа не удалась в отсутствие SakA. Для сравнения, в штамме ΔsakA -делеции в синем свете (фиг. 4C) подавлялась регуляция 80 генов. Поскольку штамм с делецией ΔsakA более чувствителен к окислительному стрессу, наблюдаемая индукция гена, зависящая от синего света и независимая от sakA , может быть связана с системой восприятия АФК.
Биогенез рибосом и метаболизм азота отрицательно регулируются
Далее мы использовали иерархический кластерный анализ, чтобы дополнительно охарактеризовать пути, идентифицированные в анализе KEGG.Мы обнаружили, что путь биогенеза рибосом сильно подавлялся после освещения. В штамме с делецией ΔfphA и делецией ΔsakA все 24 гена, репрессированные синим и красным светом, больше не репрессировались (рис. 4D) . Эти результаты предполагают, что и FphA, и SakA, по-видимому, необходимы для репрессии синим светом. Напротив, в штамме с делецией ΔlreA эти гены все еще могут быть репрессированы синим светом. Это согласуется с тем фактом, что LreA выполняет репрессивную функцию в темноте за счет прямого связывания с промотором регулируемых светом генов [28].LreA покидает промотор после освещения синим светом [28].
В анализе обогащения KEGG (фиг. 3D) , функции DEG, индуцированные красным светом, были значительно обогащены путем метаболизма азота (значение p = 0,012). Гены кодируют нитратредуктазу, нитритредуктазу, нитроалканоксидазу и нитронатмонооксигеназу (рис. 4E) . В дрожжах ассимиляция нитратов требует двух последовательных восстановлений, чтобы преобразовать нитрат в аммоний с помощью нитрат- и нитритредуктаз.В этом исследовании были активированы гены, кодирующие предполагаемые нитрат- и нитритредуктазы, и два гена, кодирующие нитроалканоксидазу и нитронатмонооксигеназу, способные превращать нитроалкан в аммоний, что потенциально способствует превращению как органического, так и неорганического азота в аммоний. Между тем, произошла активация гена, кодирующего глутаматдегидрогеназу. Красный свет более важен для индукции этих генов, чем дальний красный и синий свет. Индукция этих генов также зависела от FphA и SakA.
Второй уровень управления светом
Мы также изучили экспрессию двух других потенциальных генов, участвующих в A . nidulans световой ответ, а именно опсин-подобный белок, кодирующий ген nopA и ген циптохрома cryA . Экспрессия nopA повышалась в красном свете у дикого типа. В штамме с делецией ΔfphA и штамме с делецией ΔsakA нельзя было значительно активировать nopA в красном свете, но синий свет усиливал экспрессию nopA , когда FphA отсутствовал.Интересно, что в штамме с делецией ΔlreA , nopA сильно активируется как в красном, так и в синем свете (S6A фиг.) . cryA. был активирован в красном и синем свете у дикого типа, который зависел от LreA и SakA. В штамме с делецией ΔfphA красный свет не мог активировать экспрессию cryA .
Разветвленная фосфорелевая система, состоящая из гистидинкиназ (HHKs), фосфотрансферазы YpdA и регуляторов ответа, расположена выше пути SakA.Геном А . nidulans кодирует 15 HHK, включая рецептор красного света FphA. В синем и красном свете, кодирование 6 HHK ( tcsB , hk2 , hk-8-1 , hk-8-2 , hk-8-3 и hk-8-5 ) гены и ген ypdA были активированы у дикого типа и мутантов (фиг. 4F) . В синем свете 6 генов, кодирующих HHK ( tcsB , hk2 , hk-8-1 , hk-8-2 , hk-8-3 и hk-8-5 ) были более значительно активированы в штамме с делецией ΔlreA , чем в штамме дикого типа, но штамм с делецией ΔfphA и штамм с делецией ΔsakA не могли быть индуцированы синим светом.
В N . crassa DEGs, регулируемые светом, экспрессировались иерархически и были разделены на ранние и поздние светочувствительные гены [19]. В этом исследовании мы идентифицировали 21 предполагаемый ген, кодирующий TF, которые были индуцированы красным и синим светом (первые десять перечислены на фиг. S6B) . В штамме с делецией ΔlreA индукция этих генов у дикого типа напоминала таковую у дикого типа. Однако в штаммах с делецией ΔfphA — или ΔsakA большая часть генов, кодирующих TF, не подвергалась значительному усилению в красном свете, но в синем свете некоторые гены все еще могли индуцироваться.
Световые сигнальные пути работают в темноте
Мы также проанализировали функции FphA, LreA и SakA в темноте. По сравнению с диким типом 109 генов в штамме с делецией ΔfphA были активированы, а 210 генов подавлены (фиг. 5, S5C и S5D) . В штамме с удалением ΔlreA только 44 гена были подавлены, но 150 генов активированы. Неожиданно оказалось, что в штамме с делецией ΔsakA 751 ген был усилен, а 359 генов подавлен в темноте по сравнению с диким типом.В анализе пути KEGG, проведенном для всех 1110o, 22 основных обогащенных пути включают пути метаболизма аминокислот, метаболизма углерода, метаболизма жирных кислот и биосинтеза вторичных метаболитов.
Рис. 5. Диаграмма Венна и анализ обогащения пути KEGG для DEG, идентифицированных у мутантов, по сравнению с диким типом в темноте.
Анализ диаграммы Венна (A) , выполненный с активацией и подавлением генов у мутантов ΔsakA , ΔfphA , ΔlreA .Анализ пути KEGG проводили с DEG, идентифицированными в ΔsakA (B) , ΔfphA (C) , ΔlreA (D), соответственно. Пузырьковые диаграммы были созданы со значительно расширенными путями (значение p ≤ 0,05). Цвет пузырьков указывает значение -log 10 (значение q), а значение q представляет скорректированное значение p. Фактор богатства относится к частному от количества ДЭГ и общего количества гена в пути.
https: // doi.org / 10.1371 / journal.pgen.1009845.g005
Реакция синего света в отсутствие LreA требует криптохрома и фитохрома
Мы обнаружили, что 393 гена по-разному экспрессируются в синем свете у дикого типа, но 82% (324) из них не зависят от LreA. Это было удивительно и подняло вопрос об задействованном фоторецепторе. Мы проверили предполагаемую роль фоторецептора синего света CryA на экспрессии ccgB (рис. 6A) . Хотя уровень экспрессии ccgB снижался в синем свете, когда CryA отсутствовал, экспрессия ccgB в штамме с ΔcryA -делением все еще повышалась более чем в 140 раз в синем свете по сравнению с темнотой.Это показывает, что криптохром вносит определенный вклад в регулирование синего света, но не является существенным. Поэтому мы проверили роль фитохрома FphA в зависимой от синего света экспрессии ccgB . Интересно, что в штамме с делецией фитохрома ccgB больше не индуцировался (фиг. 6A) , что предполагает основную роль фитохрома в фотоиндукции синего света. Это подтверждается тем фактом, что 96% генов, индуцированных синим светом, требовали SakA. Чтобы проверить, может ли фитохром воспринимать синий свет, мы очистили A . nidulans фитохром выражен в E . coli и провели спектроскопический анализ. Типичные УФ / видимые спектры фитохромов состоят из двух специфических полос, одна в красной спектральной области около 700 нм (Q-полоса), а другая в синей спектральной области около 400 нм (полоса Соре). Активация фитохрома красным светом приводит к конформационному изменению, на что указывает увеличение поглощения в дальней красной области спектра около 750 нм (рис. 6B) .
Рис 6.Роль криптохрома и фитохрома в ответе на синий свет.
(A) Уровень экспрессии ccgB в штаммах дикого типа, ΔfphA-, ΔlreA- и ΔcryA -деленных штаммах. Мицелий, выращенный на поверхности дополненной жидкой минимальной среды, подвергали воздействию синего света за 15 мин до выделения РНК. Экспрессия ccgB была нормализована к гену h3b . Планка погрешности была рассчитана для трех биологических повторов. (B) Спектральный анализ фитохрома in vitro . FphA был очищен от E . coli и спектр, записанный в темноте, с последующим 2-минутным освещением красным светом для преобразования P r — в форму P fr . Форму P или освещали в течение 4 мин дальним красным светом для восстановления формы P r . (C) Аналогично (B) , но свечение формы P r синим светом в течение 30 мин. (D) Анализ обратимости индуцированной светом экспрессии гена. Экспрессия ccgA и ccgB в WT (SJR2) в темном, синем, красном и синем или красном цвете, за которым следует темнота или дальний красный свет. Различные фазы длились 15 мин. Планка погрешности была рассчитана для трех биологических повторов.
https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1009845.g006
Для исследования влияния синего света на FphA, спектр поглощения в УФ / видимой области гетерологичных экспрессированных и очищенных FphA регистрировали после облучения синим светом (450 нм). , 30 мин) ( Рис. 6C) .Облучение синим светом привело к образованию плеча в дальней красной области спектра при 754 нм, что указывает на образование активной (P дальний красный) формы Pfr. Максимум плеча, создаваемый облучением синим светом, похож на максимум пика, генерируемого облучением красным светом, даже несмотря на то, что кинетика в случае синего света намного медленнее, а амплитуда ниже, чем в случае красного света. Таким образом, эти результаты показывают, что фитохром также воспринимает синий свет и, вероятно, сигнализирует также через путь HOG.Однако красный свет, по-видимому, намного более эффективен, учитывая, что гораздо больше генов фитохром-зависимых регулируются в условиях красного света, чем в условиях синего света.
Поскольку взаимопревращение хроматических свойств фитохрома и обратимость биологических реакций, вызванных красным светом, при освещении дальним красным светом, мы проверили, можно ли обратить наблюдаемые индукции генов. С этой целью мы освещали мицелий красным или синим светом с последующим освещением дальним красным светом.Тем не менее, количество транскриптов обоих протестированных генов, ccgA и ccgB , не уменьшилось, а с дальним красным светом скорее увеличилось (Рис. 6D) .
Обсуждение
Свет очень важен для нефотосинтезирующих организмов как сигнал окружающей среды. Мы обнаружили, что в A . nidulans Уровень транскрипции более 1100 генов изменяется через 15 мин освещения (красный, дальний красный и синий свет). Это около 10% всего генома и намного больше, чем сообщалось до сих пор.В А . nidulans Было описано, что около 500 генов регулируются светом с помощью анализа микроматриц и 30-минутного воздействия белого света [38]. Хотя большая часть генов была идентифицирована в обоих исследованиях, многие из них также были обнаружены только в одном исследовании (S7 Рис.) . Вероятно, это связано с разными используемыми методами. В матричном анализе использовалось 30 минут белого света, тогда как в нашем новом исследовании использовались отдельные длины волн. Большое количество светорегулируемых генов также было обнаружено в N . crassa , где 300 генов находились под контролем света (5–240 мин белый свет, микрочипы) и T . harzianum с 460 генами (синий свет 34 секунды, 30 минут в темноте, RNAseq) [19,22]. В Ustilago maydis около 300 генов регулировались синим светом и, кроме того, некоторые отвечали на красный или дальний красный свет [48]. Хотя условия у разных организмов не были идентичными, количество регулируемых генов сопоставимо. Тот факт, что наш анализ RNAseq выявил значительно большее количество регулируемых светом генов, может быть связан с тем, что мы изучили влияние красного, дальнего красного и синего света отдельно.Это должно увеличить разрешение, потому что комбинации различных световых качеств могут отрицательно повлиять на транскрипцию определенных генов. Кроме того, мы обнаружили, что уровень экспрессии ccgA и conJ выше после 15 мин освещения, чем после 30 мин. Мы также знаем, что фосфорилирование SakA происходит уже после 5 мин освещения [31]. Следовательно, световой отклик довольно быстрый и, вероятно, кратковременный.
Огромное влияние света на экспрессию генов вызывает вопрос, важны ли эти изменения в естественных условиях, потому что монохроматический свет скорее искусственный.Однако спектральный состав света может быть разным в разных средах обитания, например, под пологом растений или в почве. Было показано, что дальний красный свет глубже проникает в почву и опаду листьев, чем свет с более короткими длинами волн [49]. Этому эффекту напоминает хроматическая адаптация цианобактерий, растущих в разных зонах водной толщи [50]. Спектральные свойства также изменяются в течение дня, и точная настройка экспрессии генов возможна, но, вероятно, намного ниже разрешающей способности экспериментов в лабораторных условиях.
Наш анализ выявил несколько интересных новых аспектов (Рис. 7) . Тот факт, что биогенез рибосом, по-видимому, снижается, может указывать на шаг паузы перед началом массовых изменений метаболома. Это может быть мерой безопасности для предотвращения ненужных изменений при кратковременных изменениях условий окружающей среды. В природе освещение, вероятно, часто меняется, например, перемещение ветвей, не вызывая немедленных резких изменений других условий окружающей среды.Следовательно, мера некоторой стойкости изменений окружающей среды была бы полезной и может быть достигнута за счет управления эффективностью перевода.
Рис. 7. Модель светорегулирующих дорожек в A . нидуланы .
LreA действует как репрессор в условиях синего и красного света, в то время как FphA воспринимает синий, красный и дальний красный свет. Помимо LreA и FphA, активные формы кислорода (ROS) могут использоваться в качестве считывающего устройства для освещения синим светом. Для получения дополнительной информации обратитесь к Обсуждению.
https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1009845.g007
Еще один интересный аспект — это роль фитохрома в синем свете и в восприятии дальнего красного света (рис. 7) . Уже в предыдущих экспериментах мы обнаружили, что дальний красный свет сильнее влияет на задержку прорастания, что теперь подчеркивается данными по экспрессии генов [40]. У растений PhyA, но не PhyB, C, D и E, также реагирует на дальний красный свет [51,52]. Это явление еще полностью не изучено, но, похоже, важно соотношение между формой Pr и Pfr.Фотопреобразование фитохрома никогда не бывает 100%, потому что спектры поглощения Pr и Pfr перекрываются. Есть также свидетельства в Arabidopsis , что фитохром может играть роль в восприятии синего света [53]. Мы также обнаружили, что криптохром играет роль в восприятии синего света. Однако, начиная с A . nidulans CryA выполняет двойную функцию в качестве светового сенсора с фотолиазной активностью, связь с экспрессией генов может быть косвенной [54]. Возможно даже, что криптохром взаимодействует с системой фитохромов [53,55].
Одной из основных характеристик фитохрома является взаимопревращение различных конформаций. Конформационные изменения, вызванные освещением красным светом, могут быть обращены освещением дальним красным светом. Также на биологическом уровне реакция обратима. В А . nidulans конидиация вызывается 30-минутным освещением красным светом, и если за красным светом следовали 30-минутное дальнее-красное освещение и мицелий инкубировали в течение 24 часов в темноте, образование конидий не индуцировалось.Напротив, мы не обнаружили обратимости индуцированной красным или синим светом экспрессии ccgA и ccgB , хотя это явно происходит с in vitro . Разные результаты на уровне экспрессии гена и биологической реакции могут быть связаны с разным временем, учитывая, что конидиация занимает 24 часа, и мы измерили количество транскриптов через 15 минут.
Было также удивительно видеть, что около 100 генов индуцировались красным светом в отсутствие фитохрома, но для их экспрессии все еще требовался SakA.Это предполагает альтернативные механизмы восприятия красного света, которые также зависят от пути HOG. На данный момент остается открытым вопрос, требуются ли для этих ответов какие-либо фоторецепторные белки или они опосредованы такими механизмами, как индуцированная синим светом продукция АФК и вторичные эффекты, обусловленные АФК. Действительно, экспрессия ферментов, участвующих в детоксикации ROS, также может контролироваться светом, как это было показано в A . alternata [56].
Раскрытие сложной светорегулирующей системы грибов остается сложной задачей.Помимо пробела в биологическом значении довольно сложных и разнообразных систем регуляции света у грибов, один большой пробел в наших знаниях касается механизмов регуляции света. Кажется довольно очевидным, что действие разных фоторецепторов, вероятно, в согласованном действии, вместе с различными другими регуляторами тесно переплетено с метаболическими и морфогенетическими путями.
стволовых клеток теряют «клей» и выходят из волосяного фолликула, вызывая выпадение волос, говорится в новом исследовании
. Прядь человеческого волоса при 200-кратном увеличении.Предоставлено: Ян Хоманн / Википедия.Недавно обнаруженная причина облысения у стареющих мышей-самцов может выявить причину выпадения волос и у мужчин, и у женщин, сообщает исследование ученых Northwestern Medicine. Полученные данные позволяют по-новому взглянуть на то, как стареют волосы и ткани.
Исследование, опубликованное в октябре в журнале Nature Aging , показывает, что по мере старения волосяных стволовых клеток они теряют липкость, которая удерживает их внутри волосяного фолликула.По мере того, как их адгезивность ослабевает, стволовые клетки выходят из своего местоположения, называемого выпуклостью, в дерму. Вне своей деликатной микросреды они, как правило, не могут выжить.
«В результате все меньше и меньше стволовых клеток в волосяном фолликуле производят волосы», — сказал ведущий автор исследования Руи Йи, профессор патологии Пола Э. Штайнера в Медицинской школе Файнберга Северо-Западного университета. «Это приводит к истончению волос и, в конечном итоге, к облысению при старении».
Это открытие, вероятно, может быть применимо к пожилым мужчинам и женщинам с истонченными волосами, потому что у мышей и людей есть много общего в волосах и стволовых клетках, сказал Йи.
Это первый случай, когда старение волосяных фолликулов отслеживается у живых животных, что позволяет ученым в реальном времени наблюдать процесс старения на клеточном уровне.
Ученые также обнаружили два ключевых гена, ответственных за усиление адгезии стволовых клеток. В текущем исследовании они пытаются восстановить эти гены, чтобы увидеть, поможет ли это обратить вспять выпадение волос.
Волосяные фолликулы всегда жизнь и смерть
Наш волосяной фолликул проходит через циклы жизни и смерти.Во время этих нормальных циклов большое количество стволовых клеток постоянно остается в отделе стволовых клеток волосяных фолликулов, продолжая производить клетки волосяных фолликулов. В этом исследовании ученые выяснили, что происходит с этими стволовыми клетками из-за старения, что приводит к истончению волос и облысению.
Как исследование продвигает исследования
«Мы считаем, что о механизме ускользания стволовых клеток никогда раньше не сообщалось, потому что никто не мог отследить процесс старения у живых животных», — сказал Йи.
Ученые знали, что волосяные фолликулы уменьшаются в размерах в процессе старения. Но как это произошло, непонятно. Многие ученые думали, что это произошло из-за гибели клеток или неспособности клеток делиться с возрастом.
«Мы обнаружили, по крайней мере частично, это связано с миграцией стволовых клеток волосяных фолликулов из своей ниши», — сказал Йи. «Смерть клеток также происходит во время наших наблюдений. Итак, наше открытие не оспаривает существующие теории, но обеспечивает новый механизм».
Как работало исследование
Ученые пометили клетки волосяных фолликулов, включая стволовые клетки, зеленым флуоресцентным белком у живых мышей и использовали длинноволновый лазер для наблюдения за клетками волосяных фолликулов во время старения.Они наблюдали один и тот же волосяной фолликул неоднократно в течение многих дней (в одном случае они наблюдали один волосяной фолликул в течение 26 дней и видели весь процесс деградации волосяного фолликула). Они увидели признаки необычного побега из камеры.
Затем они сравнили уровни экспрессии генов молодых и старых животных в стволовых клетках фолликулов. Они обнаружили меньшую экспрессию генов, ответственных за адгезию, в старых стволовых клетках волосяных фолликулов.
Затем исследователи определили особую группу генов, которые могут регулировать эти гены клеточной адгезии.Они генетически нокаутировали эти два гена, FOXC1 и NFATC1, у мутантных животных. Результат: быстрое облысение, начиная с четырех месяцев. В течение 12–16 месяцев эти мыши полностью облысели. Наконец, исследователи использовали живую визуализацию, чтобы наблюдать ускользание стволовых клеток у этих мутантных мышей и зафиксировать действие стволовых клеток, мигрирующих из ниши стволовых клеток.
Другими северо-западными авторами являются Чи Чжан (приглашенный студент), Дунмэй Ван, Цзинцзин Ван и доктор Цутому Куме.
Телескопическая модель развития волосяных фолликулов.
Дополнительная информация: Чи Чжан и др., Побег стволовых клеток волосяного фолликула вызывает истощение стволовых клеток при старении, Nature Aging (2021).DOI: 10.1038 / s43587-021-00103-w Предоставлено Северо-Западный университет
Ссылка : Стволовые клетки теряют «клей» и выходят из волосяного фолликула, вызывая выпадение волос, говорится в новом исследовании (2021, 26 октября). получено 27 октября 2021 г.